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阿南hmily

新虫 (小有名气)

[求助] 关于某一基因的功能鉴定

目前我要研究噬菌体基因组(已知全基因组序列)中的一段基因的功能,请问我要怎么做?
我的思路是,通过设计特定引物进行PCR扩增出这段基因,然后来测定这段PCR产物的序列,并通过生物信息学分析它的特性。然后将这段基因构建重组质粒,转染大肠杆菌,并在大肠杆菌体内进行稳定表达,收集表达蛋白产物,进行western blot检测目的蛋白表达情况(是通过条带的亮度来判断表达量高低吗?)。
是这样吗?
谢谢!
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yeruge

新虫 (小有名气)

过表达,或者基因敲除都可以鉴定基因的功能

发自小木虫Android客户端
2楼2015-12-29 22:52:14
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jianguochen

新虫 (小有名气)

请问楼主,您所研究的噬菌体的宿主是哪种呢;如果是已知的全基因组序列,那么可根据现有的序列分析你要研究的基因的功能再决定下一步怎么做。根据楼主所述的实验思路,得到了蛋白的表达量。如果宿主不是大肠杆菌的话,看不出这能说明你研究的基因的功能方面的问题。
3楼2015-12-30 10:12:18
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