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myszh

新虫 (初入文坛)

[求助] D101大孔树脂上样、洗脱求助!!! 已有6人参与

按照药典做党参的TLC,样品处理需要用到大孔树脂,但是小弟没做过大孔树脂,对加样和洗脱不是很清楚,有以下几点疑问,希望大侠们能指导下。。
1、加样时(柱子用乙醇、水已洗好),是把下面的阀门关闭加的吗?还是把阀门开的很小,慢慢加样?
2、我今天是把阀门开的很小加的样,但是把样品液加完了后,有颜色的样品液为什么不往下渗呢?(静置2-3小时了)
3、洗脱的时候先用水洗,那么问题来了,我今天做的时候用水洗,水洗的时候有颜色的样品液依然没有往下渗,当换到乙醇洗的时候,有颜色的样品液全部洗下来了,我觉得不太对,希望大家指导下!!!
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flora_5

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

1.看个人的手法,建议关闭阀门,上样结束后,开阀流液,放至柱床面,再加溶剂洗脱。
2.不明白你什么意思?如果开阀门而不下流,色谱柱堵了(是柱内进气泡了,属于装柱不好,或者洗脱剂浓度比例更换较大。例如,柱内高比例乙醇,加水洗脱过激,则醇水混合产生气泡,形成栓塞,堵了通路,流速降慢)。如果你说的是:样品有颜色,吸附在树脂上,当然不会下流,要不然咋分离呢?
3.梯度洗脱,分段收集流份。会吗?不会我再回答。
9楼2016-01-02 17:08:08
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hym0411

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你做的对,乙醇冲下来的的就是大孔树脂吸附的样品,水冲洗的时候就是把大孔树脂不吸附的除掉。
生而无涯
8楼2016-01-01 19:33:06
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普通回帖

thecoldest

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
正常现象,等你的TLC结果出来吧。

发自小木虫Android客户端
努力工作!
2楼2015-12-28 20:40:21
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myszh

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by thecoldest at 2015-12-28 20:40:21
正常现象,等你的TLC结果出来吧。

谢谢,明天跑完板子看下结果。
3楼2015-12-28 21:08:36
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欧阳抆泪

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1.这个没太大区别,反正大孔树脂吸附的很杂(只是没吸附那些水溶性成分),不需要考虑色谱行为。可以考虑边加边流,等试液加完前端快到阀门的时候关闭,然后吸附会。
2.有颜色的是被大孔树脂吸附了吧。
3.水洗当然洗不下来咯(水洗的就是水溶性杂质),换醇就从大孔树脂解吸附了(这才是你要的成分,毕竟后面点样也是用醇液的)。
4楼2015-12-29 01:23:06
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myszh

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 欧阳抆泪 at 2015-12-29 01:23:06
1.这个没太大区别,反正大孔树脂吸附的很杂(只是没吸附那些水溶性成分),不需要考虑色谱行为。可以考虑边加边流,等试液加完前端快到阀门的时候关闭,然后吸附会。
2.有颜色的是被大孔树脂吸附了吧。
3.水洗当然 ...

太感谢了!!!
5楼2015-12-29 09:28:56
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LVJIEQIONG

新虫 (初入文坛)

1.加样时应该把下面的开关打开,这样你的树脂有一个很好的沉积,而且刚下来的不会是你的样品,只不过是你洗树脂的溶剂罢了。
2一般洗脱出来的都是无色或者淡色的,我以前实习时候做过不知道是不是普遍现象,树脂对他相似的物质是很容易吸附的.
6楼2015-12-29 17:16:56
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myszh

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by LVJIEQIONG at 2015-12-29 17:16:56
1.加样时应该把下面的开关打开,这样你的树脂有一个很好的沉积,而且刚下来的不会是你的样品,只不过是你洗树脂的溶剂罢了。
2一般洗脱出来的都是无色或者淡色的,我以前实习时候做过不知道是不是普遍现象,树脂对 ...

谢谢,今天跑出来了!

发自小木虫Android客户端
7楼2015-12-29 23:42:09
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myszh

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by flora_5 at 2016-01-02 17:08:08
1.看个人的手法,建议关闭阀门,上样结束后,开阀流液,放至柱床面,再加溶剂洗脱。
2.不明白你什么意思?如果开阀门而不下流,色谱柱堵了(是柱内进气泡了,属于装柱不好,或者洗脱剂浓度比例更换较大。例如,柱内 ...

谢谢您!

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10楼2016-01-14 09:29:22
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