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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物化学 » D101大孔树脂上样、洗脱求助！！！
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myszh

新虫 (初入文坛)

[求助] D101大孔树脂上样、洗脱求助！！！已有6人参与

按照药典做党参的TLC，样品处理需要用到大孔树脂，但是小弟没做过大孔树脂，对加样和洗脱不是很清楚，有以下几点疑问，希望大侠们能指导下。。
1、加样时（柱子用乙醇、水已洗好），是把下面的阀门关闭加的吗？还是把阀门开的很小，慢慢加样？
2、我今天是把阀门开的很小加的样，但是把样品液加完了后，有颜色的样品液为什么不往下渗呢？（静置2-3小时了）
3、洗脱的时候先用水洗，那么问题来了，我今天做的时候用水洗，水洗的时候有颜色的样品液依然没有往下渗，当换到乙醇洗的时候，有颜色的样品液全部洗下来了，我觉得不太对，希望大家指导下！！！
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1楼2015-12-28 20:33:46
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

flora_5

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

1.看个人的手法，建议关闭阀门，上样结束后，开阀流液，放至柱床面，再加溶剂洗脱。
2.不明白你什么意思？如果开阀门而不下流，色谱柱堵了（是柱内进气泡了，属于装柱不好，或者洗脱剂浓度比例更换较大。例如，柱内高比例乙醇，加水洗脱过激，则醇水混合产生气泡，形成栓塞，堵了通路，流速降慢）。如果你说的是：样品有颜色，吸附在树脂上，当然不会下流，要不然咋分离呢？
3.梯度洗脱，分段收集流份。会吗？不会我再回答。
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9楼2016-01-02 17:08:08
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hym0411

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你做的对，乙醇冲下来的的就是大孔树脂吸附的样品，水冲洗的时候就是把大孔树脂不吸附的除掉。
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生而无涯
8楼2016-01-01 19:33:06
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thecoldest

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
正常现象，等你的TLC结果出来吧。

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努力工作！
2楼2015-12-28 20:40:21
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myszh

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by thecoldest at 2015-12-28 20:40:21
正常现象，等你的TLC结果出来吧。

谢谢，明天跑完板子看下结果。
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3楼2015-12-28 21:08:36
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欧阳抆泪

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1.这个没太大区别，反正大孔树脂吸附的很杂（只是没吸附那些水溶性成分），不需要考虑色谱行为。可以考虑边加边流，等试液加完前端快到阀门的时候关闭，然后吸附会。
2.有颜色的是被大孔树脂吸附了吧。
3.水洗当然洗不下来咯（水洗的就是水溶性杂质），换醇就从大孔树脂解吸附了（这才是你要的成分，毕竟后面点样也是用醇液的）。
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4楼2015-12-29 01:23:06
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myszh

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 欧阳抆泪 at 2015-12-29 01:23:06
1.这个没太大区别，反正大孔树脂吸附的很杂（只是没吸附那些水溶性成分），不需要考虑色谱行为。可以考虑边加边流，等试液加完前端快到阀门的时候关闭，然后吸附会。
2.有颜色的是被大孔树脂吸附了吧。
3.水洗当然 ...

太感谢了！！！
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5楼2015-12-29 09:28:56
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LVJIEQIONG

新虫 (初入文坛)
1.加样时应该把下面的开关打开，这样你的树脂有一个很好的沉积，而且刚下来的不会是你的样品，只不过是你洗树脂的溶剂罢了。
2一般洗脱出来的都是无色或者淡色的，我以前实习时候做过不知道是不是普遍现象，树脂对他相似的物质是很容易吸附的.
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6楼2015-12-29 17:16:56
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myszh

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by LVJIEQIONG at 2015-12-29 17:16:56
1.加样时应该把下面的开关打开，这样你的树脂有一个很好的沉积，而且刚下来的不会是你的样品，只不过是你洗树脂的溶剂罢了。
2一般洗脱出来的都是无色或者淡色的，我以前实习时候做过不知道是不是普遍现象，树脂对 ...

谢谢，今天跑出来了！

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7楼2015-12-29 23:42:09
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myszh

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by flora_5 at 2016-01-02 17:08:08
1.看个人的手法，建议关闭阀门，上样结束后，开阀流液，放至柱床面，再加溶剂洗脱。
2.不明白你什么意思？如果开阀门而不下流，色谱柱堵了（是柱内进气泡了，属于装柱不好，或者洗脱剂浓度比例更换较大。例如，柱内 ...

谢谢您！

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10楼2016-01-14 09:29:22
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