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新虫 (初入文坛)

[求助] 4片段装配 共18kb转化大肠杆菌不长菌落,求助各位!!

最近在做感染性克隆的构建,用NEB公司的HIFI golden gate assembly mix 作为装配液,装配三个片段到一个载体上,片段每段大约5000bp,载体大约3500bp,将三个片段和一个载体加到一起进行装配后转化DH5a,但是总是不长。请问是什么原因,是感受态的效率的问题吗?是不是换个感受态或换成电转化会好一点?希望各位高手可以帮忙分析一下!十分感谢
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