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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 实验室分析、仪器 » 反相高效液相色谱法
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硕梦宝贝

新虫 (小有名气)

[求助] 反相高效液相色谱法 已有2人参与

楼主需要用反相高效液相色谱法来分离、分析样品，但是文献写的是要用异硫氰酸苯酯与样品结合生成异硫氰酸苯酯衍生物后进行测量，为什么要做成衍生物？而且，想求助下反相高效液相色谱的实际操作注意事项。
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1楼 2015-12-25 17:03:37
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zinfly

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
硕梦宝贝(sytucom代发): 金币+5, 感谢应助，希望继续关注楼主回复，谢谢 2016-01-17 21:37:18
什么物质？为了看紫外吸收么？
注意事项可以百度，注意选好波长

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2楼2015-12-26 02:03:57
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硕梦宝贝

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zinfly at 2015-12-26 02:03:57
什么物质？为了看紫外吸收么？
注意事项可以百度，注意选好波长

蛋白，跟腱的胶原

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3楼2015-12-26 15:24:56
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zinfly

专家顾问 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 硕梦宝贝 at 2015-12-26 15:24:56
蛋白，跟腱的胶原
...

应该是为了增加紫外吸收，同时也更加稳定。

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4楼2016-01-18 07:26:32
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zinfly

专家顾问 (职业作家)
★ ★ ★ ★ ★
sytucom: 金币+5, 回帖精彩 2016-01-21 23:27:47
引用回帖:
3楼: Originally posted by 硕梦宝贝 at 2015-12-26 15:24:56
蛋白，跟腱的胶原
...

样品浓度要把握好，1-10毫克每毫升，已经足够了。进样量看柱子，一般10-20μL，检测波长可以开全波长扫描，如果没有先开220.254.365

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硕梦宝贝
5楼2016-01-18 07:29:44
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硕梦宝贝

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by zinfly at 2016-01-18 07:29:44
样品浓度要把握好，1-10毫克每毫升，已经足够了。进样量看柱子，一般10-20μL，检测波长可以开全波长扫描，如果没有先开220.254.365
...

多谢

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6楼2016-01-20 00:11:51
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shenyingbin

铁杆木虫 (著名写手)

海猫

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
sytucom: 金币+5, 感谢 2016-01-21 23:26:37
衍生的目的是有紫外吸收。可以在百度文库中找到很多液相操作的注意事项，最重要的有1.柱子要洗干净，平衡好。2.流动相要过滤，超声。3.液相方法的操作，还有对实验数据的处理，一般液相的电脑上就可以处理。
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硕梦宝贝
既往不恋，纵情向前！
7楼2016-01-20 08:54:37
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硕梦宝贝

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by shenyingbin at 2016-01-20 08:54:37
衍生的目的是有紫外吸收。可以在百度文库中找到很多液相操作的注意事项，最重要的有1.柱子要洗干净，平衡好。2.流动相要过滤，超声。3.液相方法的操作，还有对实验数据的处理，一般液相的电脑上就可以处理。

嗯啊，多谢

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8楼2016-01-21 23:20:25
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化蝶虫虫

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★
硕梦宝贝(99503102代发): 金币+5, 谢谢你的分享！ 2016-03-29 12:53:44
我们实验室用乙腈作为有机相，哇哈哈纯净水做水相，都加千分之一三氟乙酸，目的是减少拖尾，使峰形变的更规整漂亮。刚滤的流动相要超声，并且换流动相后要purge.上样之前平衡好柱子，手动进样的话，进样针里不能有气泡。

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9楼2016-01-22 00:37:10
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