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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 离子交换柱用AKT系统纯化蛋白过程中的离子曲线的一个奇怪现象
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wuyaping

新虫 (初入文坛)

[求助] 离子交换柱用AKT系统纯化蛋白过程中的离子曲线的一个奇怪现象 已有1人参与

我用的是Q柱，柱体积5ml，纯化天然蛋白用的缓冲液（A: 50mM MES,  B: 50mM MES+1M Nacl，pH=6)，洗脱程序0-20%B液线性洗脱，照理说离子曲线应该是一条直线，可是当我的目标峰出现时候离子线总会出现一个激增转折（见图），不知是怎么回事（自己弱弱的认为是不是我的目标蛋白是一个含有离子的蛋白）？特来借大家的火眼金睛，跪求大侠们的高见！

离子交换柱用AKT系统纯化蛋白过程中的离子曲线的一个奇怪现象
图片2.png
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1楼 2015-12-25 15:39:28
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milamiya

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
4楼2016-01-03 08:36:03
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
AKTA的管路很长，及混合器是2ml，拉梯度上升的太快就这样子，正常。建议B0-20%多拉几个柱体积，比如现在10个柱体积，可以增加到30，或者更多，会使纯化的效果更好，祝顺利。
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2楼2015-12-25 16:29:42
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wuyaping

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hc-material at 2015-12-25 16:29:42
AKTA的管路很长，及混合器是2ml，拉梯度上升的太快就这样子，正常。建议B0-20%多拉几个柱体积，比如现在10个柱体积，可以增加到30，或者更多，会使纯化的效果更好，祝顺利。

感谢您的回复。二十个体积的梯度我也拉过，也同样会出现这个现象
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3楼2015-12-26 11:21:17
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