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muyucaiwei

铁虫 (小有名气)

[求助] 紫外吸收光谱和激发光谱问题求助! 已有3人参与

如题,我一直没搞清楚一个物质的紫外吸收光谱和激发光谱之间的关系,二者有必然的联系吗?

我买了一个花菁类染料Cy7,说明书上说吸收在749,发射在776。我测它的紫外吸收在747,与说明书上基本一致。但是在荧光光谱仪上,用747激发时在776处却没有发射峰。最终发现用680-690的激发波长时在740左右得到了比较宽的发射峰,与说明书上的差别很大。

有哪位大神能帮忙解释下这个问题吗?还是我用普通的荧光仪不能使用749激发?初次做这个方向,还请有经验的大牛多多指导~
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xuyingemail

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

通常的做法是,
1. 先扫一个吸收光谱,得出最大吸收波长;
2.用此最大吸收波长做激发波长扫发射光谱,得出最大发射波长;
3. 用此最大发射波长扫激发光谱,得出最大激发波长。
3楼2015-12-29 14:04:50
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更深的蓝

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

有些荧光染料的激发光谱和吸收光谱重合的很好,有些不重合。你可以自己扫描一下发射和激发光谱。
低调务实!
2楼2015-12-29 12:46:12
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巫女子佩

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

激发谱是直的最大激发发射的波长,但是跟吸收谱不一定重合的,你的扫最大激发波长
4楼2015-12-29 14:42:54
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