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dashuangzi

银虫 (小有名气)

[交流] 小虫向各位请教PCR相关事宜

小虫向各位请教PCR相关事宜

各位虫友大家好:
    这是我第一次发帖子,有个问题想向大家请教一下。我是做环境纤维素降解菌方向的。我上学期作筛选出来的纯菌的DNA提取,PCR,连接转化都能做出来。今年做环境样的DNA提取不是太好,有很多杂质, PCR的带很弱,连接转化后的阳性菌落效率很低。我觉得不应该是引物问题,我用的引物是CF319,967
    还有我用16S做环境样也P不出来,出现拖尾现象。
    请问有哪位跟我做一个方向的,能给解决下,谢了。
    由于是新虫,没有太多金币,只能拿出9个意思意思。

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tianerdizi

铜虫 (小有名气)

在冰盒上进行试剂混合可以提高PCR效率,主要是冷起动法增强了PCR的特异性。
3楼2009-09-23 21:41:28
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kxli

荣誉版主 (正式写手)

与提取DNA方法有很大关系,建议用试剂盒提取DNA,特别是那些针对土壤或活性污泥的试剂盒
2楼2008-09-24 11:02:25
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