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木虫 (正式写手)

[求助] 碱裂解小量提取质粒,没有出现白色沉淀已有2人参与

最近,碱裂解小量提取质粒,两倍体积的无水乙醇沉淀核酸后,用70%的乙醇洗涤白色沉淀后,我用移液枪将沉淀吹散后,高速离心后,白色沉淀没有在出现,跑电泳也没有质粒条带,不知道是怎么回事,有哪位高手指点迷津,谢谢!
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SorryJ

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果你提出来的白色沉淀是核酸,不管你怎么吹打,它都不会溶解在70%的乙醇里,这一步只是利用30%的水去将盐离子洗掉,纯化核酸。所以只要加了乙醇,晃一晃离心管就可以啦,不放心可以多洗一次。离心完了后记得把管子倒扣在干净的吸水纸上晾干一下,拿双蒸水溶解就成了。

发自小木虫Android客户端
3楼2015-12-20 00:23:51
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科学小覃

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
现在都用试剂盒了,手工提取很少见。你这个情况估计是70%乙醇出错了吧。再者,沉淀清洗不必打散。
生物科学
2楼2015-12-19 20:45:00
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