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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 碱裂解小量提取质粒,没有出现白色沉淀
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i760912798

木虫 (正式写手)

[求助] 碱裂解小量提取质粒,没有出现白色沉淀 已有2人参与

最近，碱裂解小量提取质粒，两倍体积的无水乙醇沉淀核酸后，用70%的乙醇洗涤白色沉淀后，我用移液枪将沉淀吹散后，高速离心后，白色沉淀没有在出现，跑电泳也没有质粒条带，不知道是怎么回事，有哪位高手指点迷津，谢谢！
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1楼 2015-12-19 18:48:33
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SorryJ

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果你提出来的白色沉淀是核酸，不管你怎么吹打，它都不会溶解在70%的乙醇里，这一步只是利用30%的水去将盐离子洗掉，纯化核酸。所以只要加了乙醇，晃一晃离心管就可以啦，不放心可以多洗一次。离心完了后记得把管子倒扣在干净的吸水纸上晾干一下，拿双蒸水溶解就成了。

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3楼2015-12-20 00:23:51
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科学小覃

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
现在都用试剂盒了，手工提取很少见。你这个情况估计是70%乙醇出错了吧。再者，沉淀清洗不必打散。
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生物科学
2楼2015-12-19 20:45:00
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