[交流] 转大肠杆菌的菌落鉴定PCR，其中的一个基因正负对照都出现了拖带，求可能原因。 已有1人参与

其中的一个基因（1333bp）连接的载体是pEASY（3900多bp）全式金公司的。其菌样的PCR鉴定是正常的。如图。 另一个基因（2776bp）用的试剂是一样的，方法也是一样的。但做了若干重复试验后，结果均为：正负对照都有拖带的现象。 是因为我的这个基因插入的片段较大，而载体又过小？正负对照没跑出预期效果是我的引物浓度过高吗？还是回收的DNA浓度过高？正负对照不正常一定是PCR体系的问题了。 求大神解答啊！ 我的PCR条件为：（2776bp基因） 94度 5min； 94度 30S； 52.8度 30S； 72度  3min； 72度 7min。 图一1333bp 图二2776bp

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