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qing227

金虫 (正式写手)

[求助] 近期MTT碰到随着某个药物浓度的增加,抑制率反而减小啦

问题如标题所述,这究竟是为什么啊,还有想请教虫友们药品如果溶解度不好大家是用的什么方法
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yyy0305

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
qing227: 金币+2 2015-12-18 09:34:25
qing227: 金币+5, 有帮助 2015-12-20 16:45:06
如果是溶解度的问题,药效会随着浓度增加进入平台期,而不会是减小,楼主还需看看数据的重复性怎么样?一般药物会在DMSO中有较好的溶解度,但是注意在加药时,DMSO的终浓度不要超过0.5%,也就是说药物溶解时尽量高浓度溶解
2楼2015-12-17 23:08:02
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qing227

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yyy0305 at 2015-12-17 23:08:02
如果是溶解度的问题,药效会随着浓度增加进入平台期,而不会是减小,楼主还需看看数据的重复性怎么样?一般药物会在DMSO中有较好的溶解度,但是注意在加药时,DMSO的终浓度不要超过0.5%,也就是说药物溶解时尽量高浓 ...

补充下,我的抑制率是负值,然后还随浓度增加减小。

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3楼2015-12-17 23:23:08
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yyy0305

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by qing227 at 2015-12-17 23:23:08
补充下,我的抑制率是负值,然后还随浓度增加减小。
...

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4楼2015-12-17 23:26:03
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qing227

金虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by yyy0305 at 2015-12-17 23:26:03
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...

好,明日贴上,期待您的帮助

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5楼2015-12-17 23:27:04
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qing227

金虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yyy0305 at 2015-12-17 23:26:03
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...

现在就是这样的结果,我做了五个浓度,每个做了三个重复。

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6楼2015-12-18 08:52:37
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yyy0305

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by qing227 at 2015-12-18 08:52:37
现在就是这样的结果,我做了五个浓度,每个做了三个重复。...

问题可能出在对照组了,随着药物浓度的增加,细胞的OD值在不断减少,这个趋势说明药物是有一定效果的。你仔细回想一下对照组加入的成分和加药组出了药物以外,还有什么不一样的地方,还有就是铺板的时候细胞的密度是否一样,各组放的96孔板的位置分布是怎么样的,如果放在最外围一般都会有边缘效应的
7楼2015-12-18 18:57:26
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qing227

金虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by yyy0305 at 2015-12-18 18:57:26
问题可能出在对照组了,随着药物浓度的增加,细胞的OD值在不断减少,这个趋势说明药物是有一定效果的。你仔细回想一下对照组加入的成分和加药组出了药物以外,还有什么不一样的地方,还有就是铺板的时候细胞的密度 ...

已经重新做了,明日看结果,请问您知道在为什么在490nm处测值吗,我做了一下490nm和510nm处。结果有点出处。
8楼2015-12-20 16:44:23
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yyy0305

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by qing227 at 2015-12-20 16:44:23
已经重新做了,明日看结果,请问您知道在为什么在490nm处测值吗,我做了一下490nm和510nm处。结果有点出处。...

估计文献报道的是MTT490的居多,这是一笔糊涂账,我记得MTT氧化还原后的物质在510左右有最高的吸收峰,490也有很强的吸收信号。两个数据选一个用就行了,每个点的相对的大小不会有太大变化

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9楼2015-12-20 17:23:25
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qing227

金虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by yyy0305 at 2015-12-20 17:23:25
估计文献报道的是MTT490的居多,这是一笔糊涂账,我记得MTT氧化还原后的物质在510左右有最高的吸收峰,490也有很强的吸收信号。两个数据选一个用就行了,每个点的相对的大小不会有太大变化
...

嗯,确实变化不大,谢谢指点

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10楼2015-12-20 23:23:26
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