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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 求助关于紫外分光光度计检测蛋白OD280
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hgq115

金虫 (小有名气)

[求助] 求助关于紫外分光光度计检测蛋白OD280 已有3人参与

PAGE蛋白电泳结果显示无任何蛋白条带，紫外分光光度计检测蛋白浓度达到5.8mg/ml，检测样本缓冲液组分未知，怀疑是缓冲液中有某些组分可以影响OD280测值，求帮忙例举一些可以影响OD280测值的化学试剂
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1楼 2015-12-17 10:41:46
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yyy0305

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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感谢参与，应助指数 +1
hgq115: 金币+50, ★★★很有帮助 2015-12-24 17:33:58
题主280检测的时候，有用蛋白的缓冲液做blank，扣除背景值吗,有检测320做参比波长吗？还有用这种检测方法OD值最好控制在0.5上下，不然会不太准，OD值和蛋白浓度的换算不同蛋白的系数不一样，一般用OD值乘以0.5到1

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2楼2015-12-17 11:13:49
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hgq115: 金币+40, ★★★很有帮助 2015-12-24 17:34:26
酚酸类的都有可能。祝顺利
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3楼2015-12-17 11:39:09
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mihoutao66

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yyy0305 at 2015-12-17 11:13:49
题主280检测的时候，有用蛋白的缓冲液做blank，扣除背景值吗,有检测320做参比波长吗？还有用这种检测方法OD值最好控制在0.5上下，不然会不太准，OD值和蛋白浓度的换算不同蛋白的系数不一样，一般用OD值乘以0.5到1
...

是除以消光系数，每个蛋白不一样，知道氨基酸序列可以用软件预测的

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4楼2015-12-17 22:22:24
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mihoutao66

新虫 (初入文坛)
用的比色皿是石英的吗？

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5楼2015-12-17 22:25:36
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hgq115

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yyy0305 at 2015-12-17 11:13:49
题主280检测的时候，有用蛋白的缓冲液做blank，扣除背景值吗,有检测320做参比波长吗？还有用这种检测方法OD值最好控制在0.5上下，不然会不太准，OD值和蛋白浓度的换算不同蛋白的系数不一样，一般用OD值乘以0.5到1
...

因为是未知溶液，所以不能确定缓冲液的成分，我测了OD280和OD260,320没有测过
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6楼2015-12-24 17:33:34
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hgq115

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by mihoutao66 at 2015-12-17 22:25:36
用的比色皿是石英的吗？

是的
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7楼2015-12-24 17:34:54
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me_zzb

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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hgq115: 金币+50, ★★★很有帮助 2016-02-29 15:35:00
我们以前遇到过类似的情况，您要看一下OD260/OD280的比例，如果大于1，甚至达到1.5以上，那么样品里可能会被核酸污染了，一点点的核酸会造成很大的OD280吸收值，SDS-PAGE胶肯定检测不出来。供参考。
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8楼2015-12-25 09:57:28
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AfterDawn

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by mihoutao66 at 2015-12-17 22:22:24
是除以消光系数，每个蛋白不一样，知道氨基酸序列可以用软件预测的
...

求问有什么软件可以预测呀
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9楼2018-08-15 22:50:05
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