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hgq115

金虫 (小有名气)

[求助] 求助关于紫外分光光度计检测蛋白OD280 已有3人参与

PAGE蛋白电泳结果显示无任何蛋白条带,紫外分光光度计检测蛋白浓度达到5.8mg/ml,检测样本缓冲液组分未知,怀疑是缓冲液中有某些组分可以影响OD280测值,求帮忙例举一些可以影响OD280测值的化学试剂
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yyy0305

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
hgq115: 金币+50, ★★★很有帮助 2015-12-24 17:33:58
题主280检测的时候,有用蛋白的缓冲液做blank,扣除背景值吗,有检测320做参比波长吗?还有用这种检测方法OD值最好控制在0.5上下,不然会不太准,OD值和蛋白浓度的换算不同蛋白的系数不一样,一般用OD值乘以0.5到1

发自小木虫Android客户端
2楼2015-12-17 11:13:49
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
hgq115: 金币+40, ★★★很有帮助 2015-12-24 17:34:26
酚酸类的都有可能。祝顺利
3楼2015-12-17 11:39:09
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mihoutao66

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yyy0305 at 2015-12-17 11:13:49
题主280检测的时候,有用蛋白的缓冲液做blank,扣除背景值吗,有检测320做参比波长吗?还有用这种检测方法OD值最好控制在0.5上下,不然会不太准,OD值和蛋白浓度的换算不同蛋白的系数不一样,一般用OD值乘以0.5到1
...

是除以消光系数,每个蛋白不一样,知道氨基酸序列可以用软件预测的

发自小木虫Android客户端
4楼2015-12-17 22:22:24
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mihoutao66

新虫 (初入文坛)

5楼2015-12-17 22:25:36
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hgq115

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yyy0305 at 2015-12-17 11:13:49
题主280检测的时候,有用蛋白的缓冲液做blank,扣除背景值吗,有检测320做参比波长吗?还有用这种检测方法OD值最好控制在0.5上下,不然会不太准,OD值和蛋白浓度的换算不同蛋白的系数不一样,一般用OD值乘以0.5到1
...

因为是未知溶液,所以不能确定缓冲液的成分,我测了OD280和OD260,320没有测过
6楼2015-12-24 17:33:34
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hgq115

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by mihoutao66 at 2015-12-17 22:25:36
用的比色皿是石英的吗?

是的
7楼2015-12-24 17:34:54
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me_zzb

银虫 (初入文坛)


【答案】应助回帖

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hgq115: 金币+50, ★★★很有帮助 2016-02-29 15:35:00
我们以前遇到过类似的情况,您要看一下OD260/OD280的比例,如果大于1,甚至达到1.5以上,那么样品里可能会被核酸污染了,一点点的核酸会造成很大的OD280吸收值,SDS-PAGE胶肯定检测不出来。供参考。
8楼2015-12-25 09:57:28
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AfterDawn

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by mihoutao66 at 2015-12-17 22:22:24
是除以消光系数,每个蛋白不一样,知道氨基酸序列可以用软件预测的
...

求问有什么软件可以预测呀
9楼2018-08-15 22:50:05
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