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求助微生物胞内蛋白浓度以及SOD测定问题
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本人最近在整理学姐留下的实验数据， 实验背景是用一种抑菌物质处理金黄色葡萄球菌，测定了它的SOD、MDA、CAT过氧化指标以及胞内蛋白含量变化情况，由于本人是做蛋白质组学的，对于这些指标正常与否不甚了解，在这里有几个问题请教下各位虫友，问题如下： 1、在测定SOD、MDA、CAT数值之前需要进行粗酶液的提取，测定粗酶液的蛋白含量，请问这里不需要加PMSF等蛋白酶抑制剂么？菌体PBS溶解了以后，超声破碎，离心后，上清液就能测定蛋白浓度了？ 2、我学姐留下的数据显示，没被抑菌物质处理的菌体胞内蛋白浓度还不到1mg/ml，我以前跑电泳之前，提取金黄色葡萄球菌全蛋白时候，都需要加PMSF蛋白酶抑制剂，尿素，硫脲一系列化学实际组成的裂解液，测定的浓度基本都在10mg/ml以上，请问金黄色葡萄球菌胞内蛋白浓度1mg/ml正常么？ 希望各位虫友不吝赐教。 |
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