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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 关于病毒空斑实验
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godpilote

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于病毒空斑实验 已有1人参与

最近在尝试做空斑实验筛选病毒，因为实验室没人做过这方面，所以一直在默默的摸索。但是做了三次都失败了....  实验中有用到琼脂培养基来配制混合培养基。请问那琼脂培养基可以用跑电泳的琼脂糖配置，还是配细菌培养基的纯化琼脂粉来配制

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1楼 2015-12-11 18:45:08
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yyy0305

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
几年前做过病毒空斑实验，用的是低熔点的琼脂糖，用培养基溶解琼脂糖，加热混匀后平衡到37度，吸去病变的细胞培养液，加入琼脂糖培养基，放室温至培养基凝固，这一步很重要，再放入培养箱培养

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2楼2015-12-11 20:17:14
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zoebio

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yyy0305 at 2015-12-11 20:17:14
几年前做过病毒空斑实验，用的是低熔点的琼脂糖，用培养基溶解琼脂糖，加热混匀后平衡到37度，吸去病变的细胞培养液，加入琼脂糖培养基，放室温至培养基凝固，这一步很重要，再放入培养箱培养
...

请问你为什么要吸去病变的细胞培养液，不是让它继续吸附细胞，培养一段时间，产生空斑吗?
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3楼2016-11-22 11:26:25
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yyy0305

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by zoebio at 2016-11-22 11:26:25
请问你为什么要吸去病变的细胞培养液，不是让它继续吸附细胞，培养一段时间，产生空斑吗?...

病毒在培养液中是处于随机运动状态的，单个病毒扩增以后的子代会扩散到其他地方，这样就达不到空斑测滴度的目的了，所以才需要用琼脂糖固定。病毒和细胞混合一段时间后，有活力的病毒已经进入细胞内，培养液里面的病毒这个实验看来是默认其没有活力了。
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4楼2016-11-22 12:46:12
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