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aaa13882528

铁虫 (小有名气)

[求助] 各位,有个关于构建原核蛋白共表达质粒问题请教大家 已有1人参与

现在我有两个原核蛋白的表达质粒,两个蛋白都带GST标签,因为研究需要,想把它们构建到同一个原核表达载体上表达,请问应该怎么构建,有没有做过的虫友提供一些方法,有步骤更好,谢谢
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a86052

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以用pET-Duet等载体,这类载体有两个多克隆位点区域,可以将两个基因分别连接进去。
2楼2015-12-11 14:04:24
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aaa13882528

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by a86052 at 2015-12-11 14:04:24
可以用pET-Duet等载体,这类载体有两个多克隆位点区域,可以将两个基因分别连接进去。

谢谢,是要先连一个再连另一个,还是两个基因同时连
3楼2015-12-11 14:17:20
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a86052

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
aaa13882528: 金币+20, ★★★很有帮助 2015-12-14 17:28:52
引用回帖:
3楼: Originally posted by aaa13882528 at 2015-12-11 14:17:20
谢谢,是要先连一个再连另一个,还是两个基因同时连...

我们一般先连接一个,然后提质粒后再酶切,把另一个连进去
4楼2015-12-11 16:29:45
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