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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 各位，有个关于构建原核蛋白共表达质粒问题请教大家
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aaa13882528

铁虫 (小有名气)

[求助] 各位，有个关于构建原核蛋白共表达质粒问题请教大家 已有1人参与

现在我有两个原核蛋白的表达质粒，两个蛋白都带GST标签，因为研究需要，想把它们构建到同一个原核表达载体上表达，请问应该怎么构建，有没有做过的虫友提供一些方法，有步骤更好，谢谢
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1楼 2015-12-11 13:41:28
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a86052

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以用pET-Duet等载体，这类载体有两个多克隆位点区域，可以将两个基因分别连接进去。
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2楼2015-12-11 14:04:24
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aaa13882528

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by a86052 at 2015-12-11 14:04:24
可以用pET-Duet等载体，这类载体有两个多克隆位点区域，可以将两个基因分别连接进去。

谢谢，是要先连一个再连另一个，还是两个基因同时连
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3楼2015-12-11 14:17:20
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a86052

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
aaa13882528: 金币+20, ★★★很有帮助 2015-12-14 17:28:52
引用回帖:
3楼: Originally posted by aaa13882528 at 2015-12-11 14:17:20
谢谢，是要先连一个再连另一个，还是两个基因同时连...

我们一般先连接一个，然后提质粒后再酶切，把另一个连进去
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4楼2015-12-11 16:29:45
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