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814257155

新虫 (初入文坛)

[交流] 做过毛发提取DNA的前辈们帮分析下原因。 已有2人参与

毛发提取DNA，消化12小时后，溶液应该是澄清的吗？我做的怎么还有不少没消化的毛发？

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1楼 2015-12-10 21:46:57
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zhangyunjing

金虫 (小有名气)
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抽提毛发中的基因组DNA，起始是毛囊细胞的基因组DNA，如果毛发在取样过程中不带毛囊细胞，是不会抽提出DNA的。所以抽提毛发中DNA无需将毛发完全消化，只需要将毛囊细胞释放出来裂解即可
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rainwater
2楼2015-12-11 16:47:18
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814257155

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhangyunjing at 2015-12-11 16:47:18
抽提毛发中的基因组DNA，起始是毛囊细胞的基因组DNA，如果毛发在取样过程中不带毛囊细胞，是不会抽提出DNA的。所以抽提毛发中DNA无需将毛发完全消化，只需要将毛囊细胞释放出来裂解即可

谢谢您百忙之中抽空给我解答，我用的是有毛囊的毛发做的实验，整个过程也是按照实验步骤上做的，并且做了20多个样，但是检测时还是没有DNA条带，请问，可能是试剂的原因吗？
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3楼2015-12-17 19:15:55
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bhl2012

银虫 (小有名气)
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样品一定要确定带有白色毛囊  你用多少头发 是不是提取量太低跑不出来。你用什么方法提的。

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4楼2015-12-18 09:29:38
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zhangyunjing

金虫 (小有名气)
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引用回帖:
3楼: Originally posted by 814257155 at 2015-12-17 19:15:55
谢谢您百忙之中抽空给我解答，我用的是有毛囊的毛发做的实验，整个过程也是按照实验步骤上做的，并且做了20多个样，但是检测时还是没有DNA条带，请问，可能是试剂的原因吗？...

一根头发含有的毛囊细胞很少，建议使用微量基因组DNA抽提试剂盒，自己配试剂需要反复的摸索和优化，周期长，也不一定能抽出来。给你传个图片看看毛囊细胞基因组的浓度是这样是否满足你的要求，其中第8和9是毛囊抽提gDNA电泳图，对应的试剂盒说明书见附件，可以参考一下。
做过毛发提取DNA的前辈们帮分析下原因。
1-修改后.jpg
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    • 2015-12-18 16:04:59, 8.14 M
rainwater
5楼2015-12-18 16:05:11
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