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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 用293T细胞做转染，现在表达量降低了很多，怎么办？
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豆芽长长

铁虫 (初入文坛)

[求助] 用293T细胞做转染，现在表达量降低了很多，怎么办？ 已有3人参与

293做转染表达量很低，新买了细胞还是不行，该怎么办？？？？？？？？
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1楼 2015-12-10 20:10:14
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豆芽长长

铁虫 (初入文坛)
2楼2015-12-10 20:11:27
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yyy0305

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你是通过什么手段监控转染效率的？首先排查监控的手段灵敏和可靠不，提高转染效率，主要看细胞状态好坏，细胞转染前可以进行一段时间的无血清饥饿处理，脂质体和质粒的转染比例，质粒的质量，是否有高含量的内毒素？这方面去试试

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3楼2015-12-10 22:57:13
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biocherry

铁虫 (正式写手)
什么转染方法呢

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4楼2015-12-10 23:31:27
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我哥俩

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

我也遇到过这种问题，有可能是细胞已经老化了，重新复苏新的细胞就好了
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5楼2015-12-14 13:06:24
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ysk1989

新虫 (小有名气)
转染效率较低，建议您换一种转染试剂。我们实验室现在用的是英格恩生物专门针对293T细胞的转染试剂，效果很好，转染效率很高。
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6楼2016-07-28 10:55:28
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Explor

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你可以排查下问题，看看是不是试剂盒问题，293T细胞一般还是很好转的，RFect的毒性较低，我之前用着挺好的。
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个性化基因研究、科研试剂、诊断试剂和实验服务
7楼2019-11-21 14:45:48
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