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豆芽长长

铁虫 (初入文坛)

[求助] 用293T细胞做转染,现在表达量降低了很多,怎么办? 已有3人参与

293做转染表达量很低,新买了细胞还是不行,该怎么办????????
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豆芽长长

铁虫 (初入文坛)

2楼2015-12-10 20:11:27
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yyy0305

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你是通过什么手段监控转染效率的?首先排查监控的手段灵敏和可靠不,提高转染效率,主要看细胞状态好坏,细胞转染前可以进行一段时间的无血清饥饿处理,脂质体和质粒的转染比例,质粒的质量,是否有高含量的内毒素?这方面去试试

发自小木虫Android客户端
3楼2015-12-10 22:57:13
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biocherry

铁虫 (正式写手)

4楼2015-12-10 23:31:27
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我哥俩

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

我也遇到过这种问题,有可能是细胞已经老化了,重新复苏新的细胞就好了
5楼2015-12-14 13:06:24
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ysk1989

新虫 (小有名气)


转染效率较低,建议您换一种转染试剂。我们实验室现在用的是英格恩生物专门针对293T细胞的转染试剂,效果很好,转染效率很高。
6楼2016-07-28 10:55:28
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Explor

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你可以排查下问题,看看是不是试剂盒问题,293T细胞一般还是很好转的,RFect的毒性较低,我之前用着挺好的。
个性化基因研究、科研试剂、诊断试剂和实验服务
7楼2019-11-21 14:45:48
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