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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 小白问:何为外标法
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tangzunxiang

新虫 (小有名气)

[交流] 小白问:何为外标法

请问各位大虾,何为HLPC的外标法啊...我不知道怎么用积分面积算反应的产率,能说得详细点吗
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1楼 2008-09-21 22:21:20
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swallowll

金虫 (正式写手)
★ ★
dnp(金币+2):谢谢，请继续关注下:)
外标法

用待测组分的纯品作对照物质，以对照物质和样品中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法称为外标法。此法可分为工作曲线法及外标一点法等。工作曲线法是用对照物质配制一系列浓度的对照品溶液确定工作曲线，求出斜率、截距。在完全相同的条件下，准确进样与对照品溶液相同体积的样品溶液，根据待测组分的信号，从标准曲线上查出其浓度，或用回归方程计算，工作曲线法也可以用外标二点法代替。通常截距应为零，若不等于零说明存在系统误差。工作曲线的截距为零时，可用外标一点法(直接比较法)定量。
外标一点法是用一种浓度的对照品溶液对比测定样品溶液中i组分的含量。将对照品溶液与样品溶液在相同条件下多次进样，测得峰面积的平均值，用下式计算样品中i组分的量：
    W＝A(W)／(A)
式中W与A分别代表在样品溶液进样体积中所含i组分的重量及相应的峰面积。(W)及(A)分别代表在对照品溶液进样体积中含纯品i组分的重量及相应峰面积。外标法方法简便，不需用校正因子，不论样品中其他组分是否出峰，均可对待测组分定量。但此法的准确性受进样重复性和实验条件稳定性的影响。此外，为了降低外标一点法的实验误差，应尽量使配制的对照品溶液的浓度与样品中组分的浓度相近。　
外标法 external standard method 色谱分析中的一种定量方法，它不是把标准物质加入到被测样品中，而是在与被测样品相同的色谱条件下单独测定，把得到的色谱峰面积与被测组分的色谱峰面积进行比较求得被测组分的含量。外标物与被测组分同为一种物质但要求它有一定的纯度，分析时外标物的浓度应与被测物浓度相接近，以利于定量分析的准确性。
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3楼2008-09-22 17:01:37
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不再陌生

金虫 (小有名气)
★ ★
dnp(金币+2):谢谢
是HPLC吧！所谓外标法，简单的说是用已知浓度的该物质的标准物标定你所要测定的未知浓度的该物质！至于后一问题！A1（标准物积分面积）/A2（未知物积分面积）=C1（标准物浓度）/C2（未知物浓度），详细答案兄弟最好查阅文献！
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2楼2008-09-21 22:40:46
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tangzunxiang

新虫 (小有名气)
2楼的兄弟说的我也明白,3楼的兄弟的资料我也看过,但是我还是很迷惑,到底怎样操作才能测得产物的产率?
以前师兄师姐都是把和HPLC的积分面积比直接作为反应的产率,但仔细一想就能知道这是错误的.
比如 A+B+C=D 这样一个反应.将粗产物做HPLC,得到积分面积比: 20%,20%,20%,40%假设ABCD都出峰,没有其他副产物.产率当然不是40%,而应该是66.7%.
能有人简单直接告诉我到底怎么通过HPLC测产率吗?不考虑过柱,重结晶等提纯得到产物净重的方法.
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4楼2008-09-22 20:59:13
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jackzfx

★ ★
dnp(金币+2):谢谢参与讨论，请继续关注下:)
我个人理解是这样的
1.你做一个反应时可以根据原料的量以及反应的方程可以求出一个理论的产量，即反应后你的粗品中理论的产物含量为多少。
2.通过HPLC外表法测定出实际的产物含量。
3.这两个结果的比就是产率。
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5楼2008-09-22 22:33:11
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