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反对派

银虫 (正式写手)

[求助] CHO细胞培养基、培养方法

求CHO细胞培养基及培养方法,要求以近三年的文献的方法为主!
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biocherry

铁虫 (正式写手)

一般用含有F12的培养基培养,加血清,加谷氨酰胺。

发自小木虫Android客户端
2楼2015-12-09 21:11:00
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biocherry

铁虫 (正式写手)

3楼2015-12-09 21:11:44
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renbingling

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 反对派 at 2015-12-10 08:44:40
CHO细胞的保种方法是否和肿瘤细胞一样?即消化后-80摄氏度过夜,然后转到液氮罐长期保存?
我们这里一个实验员将别人邮寄过来的CHO细胞放-20℃4天,估计死光了吧?
她还狡辩说别人要求-20摄氏度保存。

的确要放到-80后放到液氮,当然放到-80一年半年也是没问题的
细胞大规模培养工艺
6楼2015-12-10 08:52:20
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反对派

银虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by biocherry at 2015-12-09 21:11:44
很好养,注意无菌操作

CHO细胞的保种应该和肿瘤细胞一样吧:-80摄氏度过夜后,转至液氮罐长期保存?
最近一个教授的实验室实验员(没养过细胞)将CHO细胞放-20摄氏度3天多时间,应该完全死完了吧。
4楼2015-12-10 08:39:46
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反对派

银虫 (正式写手)

CHO细胞的保种方法是否和肿瘤细胞一样?即消化后-80摄氏度过夜,然后转到液氮罐长期保存?
我们这里一个实验员将别人邮寄过来的CHO细胞放-20℃4天,估计死光了吧?
她还狡辩说别人要求-20摄氏度保存。
5楼2015-12-10 08:44:40
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

引用回帖:
5楼: Originally posted by 反对派 at 2015-12-10 08:44:40
CHO细胞的保种方法是否和肿瘤细胞一样?即消化后-80摄氏度过夜,然后转到液氮罐长期保存?
我们这里一个实验员将别人邮寄过来的CHO细胞放-20℃4天,估计死光了吧?
她还狡辩说别人要求-20摄氏度保存。

CHO细胞是真核蛋白表达时候常用的细胞之一(还有HEK293,不过293细胞一般用于短期的细胞瞬时转染表达,CHO细胞适合稳定转染细胞株构建)两者的适用性还是有差别的,,
细胞冻存的话肯定不能再-20度,慢栋,4度3h,-20 4h(可省略),-80过夜,液氮保存要求是这个顺序,-20保存3 4天,细胞不会死光,估计活力应该不行了吧,你可以取点出来做实验,或MTT检验一下细胞活性,如果来得及就重新培养冻存。
关于CHO培养的资料有很多,你可以当做参考
http://www.detaibio.com/topics/cell-culture-xibaopeiyang.html
文献的话,应该没有专门针对培养CHO细胞的文献,基本上是利用哺乳动物细胞转染生产蛋白然后需要养CHO细胞,楼主可以看一下都常用只是各个实验室操作的差别(或者有血清无血清,悬浮还是贴壁,基本差不多~)
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
7楼2015-12-10 10:32:00
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反对派

银虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by renbingling at 2015-12-10 08:52:20
的确要放到-80后放到液氮,当然放到-80一年半年也是没问题的...

谢谢!CHO细胞培养基的具体成分,比如DMEM与F12的体积比,谷氨酰胺的终浓度为多少?
8楼2015-12-10 10:40:25
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biocherry

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 反对派 at 2015-12-10 10:40:25
谢谢!CHO细胞培养基的具体成分,比如DMEM与F12的体积比,谷氨酰胺的终浓度为多少?...

基础培养基就是含有F12,直接买含有F12的培养基,谷氨酰胺一般1%

发自小木虫Android客户端
9楼2015-12-10 11:42:37
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renbingling

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 反对派 at 2015-12-10 10:40:25
谢谢!CHO细胞培养基的具体成分,比如DMEM与F12的体积比,谷氨酰胺的终浓度为多少?...

这个网上有具体的成分
细胞大规模培养工艺
10楼2015-12-11 09:28:28
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