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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » RNA实验耗材及试剂处理
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陈爱中

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by 五色茶 at 2015-12-09 08:51:25
EP管我也是用的axygen 的，在超净工作台里打开了很多次，不知道需要需要重新处理~...

以我做了三年多的RNA的经验，很少有说是外源污染导致降解，反而是你样品的保存以及开始研磨或者其他处理的时候，不够迅速导致降解。

我也从来没有在超净台做过。 管子都是就在外面实验桌上开来开去的。
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五色茶
11楼2015-12-09 09:15:52
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五色茶

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 13655322301 at 2015-12-09 08:48:58
将要用的玻璃仪器用depc水浸泡过夜，用玻璃瓶装去离子水，高温高压灭菌（在这个过程中，depc会分解失去毒性），然后在超净工作台上将depc加入到无菌水中备用。

两次高温高压灭菌？直接用配好的无菌水在玻璃瓶里配DEPC水，然后高温高压灭菌不可以么？
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一寸光阴一寸金，寸金难买寸光阴
12楼2015-12-09 09:33:50
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五色茶

铜虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
11楼: Originally posted by 陈爱中 at 2015-12-09 09:15:52
以我做了三年多的RNA的经验，很少有说是外源污染导致降解，反而是你样品的保存以及开始研磨或者其他处理的时候，不够迅速导致降解。

我也从来没有在超净台做过。 管子都是就在外面实验桌上开来开去的。...

好的，谢谢~
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一寸光阴一寸金，寸金难买寸光阴
13楼2015-12-09 09:38:33
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781055707

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
提不出来最大原因是1，样品不新鲜
                  2，RNA提取试剂盒的原因
枪头只要普通的灭菌就行了。也不一定要DEPC水，我用普通的二蒸水和DEPC水溶解RNA，两个做比对，得到的RNA效果都差不多。
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采菊东篱下，悠然见南山。
14楼2015-12-09 09:45:57
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龙海啸
。

发自小木虫IOS客户端
15楼2015-12-09 10:20:36
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xushiqi001

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by 五色茶 at 2015-12-09 08:53:39
移液枪是在超净工作台里专用的，吸头用的axygen盒装的，现在盒装的快用完了，只有axygen袋装的了，所以在纠结要不要泡DEPC水处理一下。...

DEPC水是加到0.1%浓度，剧烈震荡后静置过夜，然后打开容器高温高压灭菌，枪头用0.1%的DEPC水溶液浸泡过夜，然后高温高压蒸汽灭菌至少30min,移液器用DEPC水配制的75%酒精擦枪体。

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五色茶
16楼2015-12-09 13:48:13
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13655322301

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
12楼: Originally posted by 五色茶 at 2015-12-09 09:33:50
两次高温高压灭菌？直接用配好的无菌水在玻璃瓶里配DEPC水，然后高温高压灭菌不可以么？...

要是配好后继续高温灭菌，depc就分解没有作用了#^_^#

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17楼2015-12-10 10:49:43
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五色茶

铜虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
16楼: Originally posted by xushiqi001 at 2015-12-09 13:48:13
DEPC水是加到0.1%浓度，剧烈震荡后静置过夜，然后打开容器高温高压灭菌，枪头用0.1%的DEPC水溶液浸泡过夜，然后高温高压蒸汽灭菌至少30min,移液器用DEPC水配制的75%酒精擦枪体。
...

谢谢~
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一寸光阴一寸金，寸金难买寸光阴
18楼2015-12-10 21:52:58
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五色茶

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by 13655322301 at 2015-12-10 10:49:43
要是配好后继续高温灭菌，depc就分解没有作用了#^_^#
...

主要是去除水里的RNA酶啊~
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一寸光阴一寸金，寸金难买寸光阴
19楼2015-12-10 21:53:27
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五色茶

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 781055707 at 2015-12-09 09:45:57
提不出来最大原因是1，样品不新鲜
                  2，RNA提取试剂盒的原因
枪头只要普通的灭菌就行了。也不一定要DEPC水，我用普通的二蒸水和DEPC水溶解RNA，两个做比对，得到的RNA效果都差不多。

做的不是RNA的提取~
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一寸光阴一寸金，寸金难买寸光阴
20楼2015-12-10 21:55:16
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