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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 求教基因敲除中同源单交换和双交换的区别。
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岳大白

新虫 (初入文坛)

[求助] 求教基因敲除中同源单交换和双交换的区别。 已有1人参与

我在一篇文献中看到基因敲除时，1.将带有抗性基因和缺失目的基因的质粒，全部整合到细菌基因组上，得到同源单交换。2.通过对单交换的菌进行蔗糖筛选，挑选出不抗性的菌，得到双交换的菌。那么问题来了，我在1中得到的单交换已经将基因敲掉了，为什么还要第2步呢？

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1楼 2015-12-07 16:07:17
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爱总是年轻

新虫 (小有名气)
关于单交换和双交换的实验操作，我有疑问，在进行单交换和双交换的时候应该用受体菌的培养基还是供体菌的？这里应该如果选择用什么培养基，最终得到的只有敲除成功的受体菌吗，一开始携带重组质粒的供体菌已经全部被筛除了吗？请指点！
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总有人要赢，为什么那个不能是我
3楼2017-06-16 22:06:32
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redx2011

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
单交换只是将载体中的部分整合到基因组上去了，通过第二次交换才能将目标基因缺失掉。用蔗糖板是去除没有发生第二次交换的菌株。
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大家一起努力
2楼2015-12-08 13:58:26
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