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汕头大学海洋科学接受调剂
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岳大白

新虫 (初入文坛)

[求助] 求教基因敲除中同源单交换和双交换的区别。 已有1人参与

我在一篇文献中看到基因敲除时,1.将带有抗性基因和缺失目的基因的质粒,全部整合到细菌基因组上,得到同源单交换。2.通过对单交换的菌进行蔗糖筛选,挑选出不抗性的菌,得到双交换的菌。那么问题来了,我在1中得到的单交换已经将基因敲掉了,为什么还要第2步呢?

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爱总是年轻

新虫 (小有名气)

关于单交换和双交换的实验操作,我有疑问,在进行单交换和双交换的时候应该用受体菌的培养基还是供体菌的?这里应该如果选择用什么培养基,最终得到的只有敲除成功的受体菌吗,一开始携带重组质粒的供体菌已经全部被筛除了吗?请指点!
总有人要赢,为什么那个不能是我
3楼2017-06-16 22:06:32
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redx2011

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
单交换只是将载体中的部分整合到基因组上去了,通过第二次交换才能将目标基因缺失掉。用蔗糖板是去除没有发生第二次交换的菌株。
大家一起努力
2楼2015-12-08 13:58:26
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