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秋叶落尘

铁虫 (小有名气)

[求助] HPLC的峰面积与UV吸收峰 已有3人参与

用UV检测一种物质,在255 nm和280 nm都有吸收,但是255的吸收很大,280吸收很小。然后用HPLC检测,同一个样品,为什么同一保留时间时,280的峰面积比255的峰面积大很多?求助!!
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shi102241218

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
秋叶落尘(200782060代发): 金币+3, 感谢交流 2015-12-12 11:34:52
你这是正常现象,不同波长信号的强度肯定不一样,你再换个波长也许没信号呢,液相紫外检测器时的波长选择查文献或者是样品紫外的最大吸收波长
7楼2015-12-08 08:46:10
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yan1984

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
秋叶落尘(200782060代发): 金币+3, 感谢交流 2015-12-12 11:34:38
个人认为可能是有些杂质没分离和主峰一起导致的峰面积不同。
如果能上图谱看看就好了。
2楼2015-12-03 17:18:49
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秋叶落尘

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yan1984 at 2015-12-03 17:18:49
个人认为可能是有些杂质没分离和主峰一起导致的峰面积不同。
如果能上图谱看看就好了。

我是用的纯物质啊。就是因为不知道HPLC用那胳膊长,所以才先测得紫外。
3楼2015-12-04 16:53:25
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秋叶落尘

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yan1984 at 2015-12-03 17:18:49
个人认为可能是有些杂质没分离和主峰一起导致的峰面积不同。
如果能上图谱看看就好了。

但是同一样品进HPLC后,同一保留时间时,在280 nm处的峰面积是1600多,在255 nm处的峰面积是600多。
HPLC的峰面积与UV吸收峰
紫外图谱.png

4楼2015-12-05 15:12:06
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