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yierangel

金虫 (小有名气)

[交流] 求助:SDS-PAGE电泳后脱色后怎么没条带了?

各位虫哥虫姐们:
    最近刚开始做蛋白,跑了两次SDS-PAGE,我确定在脱色过程中还能看到条带的,结果在脱尽背景色后条带消失了,两次都是这样的,不知道为什么。有老师说是染色脱色的问题,我所用的染色脱色液配方如下:
   
    脱色液:乙醇250ml,冰醋酸80ml,蒸馏水定容至1000ml;
    染色液:0.29g考马斯亮蓝R-250溶于250ml脱色液中。
   
    请教各位蛋白虫子专家帮我找找原因,谢谢~~~
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
司马诸葛(金币+2,VIP+0):谢谢交流 7-14 10:01
(10)固定液-染色液:1.25g考马斯亮蓝G-250,加入227mL 甲醇溶液、46mL冰乙酸和227mL蒸馏水。
(11)脱色液:75mL冰乙酸,875mL蒸馏水与50mL甲醇混匀。

其中甲醇可以用乙醇代替
我用的是这个

反正脱色是看到信噪比最高就可以停了,有一点点背景无所谓
2楼2008-09-19 10:15:20
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yierangel

金虫 (小有名气)

我试试看,如果还是有问题我再向你请教了~~
谢谢这位哥哥了~~
3楼2008-09-19 10:30:58
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