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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » MCF-7细胞转染
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mengyuan86

铜虫 (小有名气)

[求助] MCF-7细胞转染 已有2人参与

我在PEGFP-C1上连接了我的目的片段，用此重组质粒转染MCF-7细胞，同时用空载体PEGFP-C1做阴性对照，另外，还做转染试剂（PEI）对照。48h后real-time PCR检测目的基因的过表达情况，结果空载体组目的基因的表达还比过表达组稍高，这是怎么回事？请有经验的前辈们指导一下。
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1楼 2015-12-01 15:12:18
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匿名

用户注销 (著名写手)
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2楼2015-12-17 13:53:57
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czbd2016

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我个人认为是转染试剂出现了问题，可能是你们实验组使用的转染试剂的细胞毒性偏高，我们前一段时间用的RFect转染试剂，用下来效果还不错，主要是细胞转阳性率高，另外就是细胞毒性小。
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3楼2018-11-22 09:40:33
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cxkhhh

新虫 (小有名气)
附议楼上提到的RFECT，转染细胞的毒性确实是低的，由于siRNA沉默时效性的影响，转染后48小时才能进行进行qRT-PCR检测，转染后48-72小时才能 进行蛋白检测。
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4楼2019-04-02 14:16:54
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