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[交流]
关于分子生物学的连接问题
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这几天在实验室构建一个质粒，载体是5.5kb，外源片段是1000bp的，我把载体和外源片段用相同的双切酶酶切然后回收，回收之后我又取2ul跑胶鉴定，同时用了2000和15000的marker，鉴定之后也是对的，但是连接之后再转化再小提然后再酶切鉴定，得到的却只有载体的一条带或者外源片段的的带偏小，约500bp左右，我怀疑是连接的时候出了问题，但是不知道问题出在何处!!!! 那位高手给我点拨一下，不胜感激！！！  |
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