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liuxj7007

铜虫 (初入文坛)

[交流] 关于分子生物学的连接问题

这几天在实验室构建一个质粒,载体是5.5kb,外源片段是1000bp的,我把载体和外源片段用相同的双切酶酶切然后回收,回收之后我又取2ul跑胶鉴定,同时用了2000和15000的marker,鉴定之后也是对的,但是连接之后再转化再小提然后再酶切鉴定,得到的却只有载体的一条带或者外源片段的的带偏小,约500bp左右,我怀疑是连接的时候出了问题,但是不知道问题出在何处!!!!

那位高手给我点拨一下,不胜感激!!!
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虫虫8328

木虫 (小有名气)

转化后做菌落PCR,多挑些克隆。
2楼2008-09-18 22:56:20
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