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跟达尔文旅行

铜虫 (小有名气)

[求助] 菌种发酵性能衰退及复壮问题 已有4人参与

本人接手了已毕业师兄诱变的一株菌做生物转化,目的是通过发酵培养到一定时间后,加入底物,利用胞内酶催化合成目的产物。现在,底物转化率远远低于师兄所发表的产量,老师说得复壮。但现在时间很紧迫,,想请问各位有做过复壮的朋友们能不能把你们比较好的方法告诉我,使我避免走弯路,急急急,万分感谢
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al2088

新虫 (初入文坛)

为什么我看完书后感觉复壮就是一般的筛选菌种呢?从退化的菌落里,筛选出那些还没有退化的菌体?稀释涂布~初筛~复筛~选出最好的?

发自小木虫Android客户端
9楼2015-12-01 20:09:16
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普通回帖

slwr

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
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跟达尔文旅行: 金币+2 2015-12-01 12:13:34
有没有原始保存的菌种?或传代次数少的菌种?传代次数多会出现退化问题。我们实验室一般都是找最原始保存的菌种,再活化。
2楼2015-11-30 21:57:14
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跟达尔文旅行

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by slwr at 2015-11-30 21:57:14
有没有原始保存的菌种?或传代次数少的菌种?传代次数多会出现退化问题。我们实验室一般都是找最原始保存的菌种,再活化。

老师说得从甘油管保藏的菌种中筛出高产菌,我是想请教从甘油管中可能回复突变的菌种中筛出高产菌的步骤。详细点儿的
3楼2015-12-01 12:13:11
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tanliangzhi

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
找看看有没有之前保存传代次数少的菌种,或者试下抗生素筛选,胞内酶加IPTG没
4楼2015-12-01 13:31:50
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跟达尔文旅行

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by tanliangzhi at 2015-12-01 13:31:50
找看看有没有之前保存传代次数少的菌种,或者试下抗生素筛选,胞内酶加IPTG没

是一种黄单胞菌,无抗生素抗性,能够鉴别的唯一指标就是底物转化率。是不是只能通过从甘油管中点菌平板划线,然后一一挑取单菌落进行发酵,测底物转化率?这样工作量是相当大啊
5楼2015-12-01 14:05:42
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slwr

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 跟达尔文旅行 at 2015-12-01 12:13:11
老师说得从甘油管保藏的菌种中筛出高产菌,我是想请教从甘油管中可能回复突变的菌种中筛出高产菌的步骤。详细点儿的...

这个我就没做过了,我们之前是直接保存的试管,没加甘油。不好意思,帮不了你了。
6楼2015-12-01 15:16:23
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跟达尔文旅行

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by slwr at 2015-12-01 15:16:23
这个我就没做过了,我们之前是直接保存的试管,没加甘油。不好意思,帮不了你了。...

还是谢谢你
7楼2015-12-01 16:12:27
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xiaojiancai

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以考虑在其原始分离底物中复壮。
知福福常在,随缘缘自来!
8楼2015-12-01 19:48:51
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wangtianjin

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
只有不停的划板,挑,接,,看运气吧,挑到高表达的算你运气好

发自小木虫Android客户端
10楼2015-12-01 20:13:44
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