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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 菌种发酵性能衰退及复壮问题
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跟达尔文旅行

铜虫 (小有名气)

[求助] 菌种发酵性能衰退及复壮问题 已有4人参与

本人接手了已毕业师兄诱变的一株菌做生物转化，目的是通过发酵培养到一定时间后，加入底物，利用胞内酶催化合成目的产物。现在，底物转化率远远低于师兄所发表的产量，老师说得复壮。但现在时间很紧迫，，想请问各位有做过复壮的朋友们能不能把你们比较好的方法告诉我，使我避免走弯路，急急急，万分感谢
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1楼 2015-11-30 20:51:18
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al2088

新虫 (初入文坛)
为什么我看完书后感觉复壮就是一般的筛选菌种呢？从退化的菌落里，筛选出那些还没有退化的菌体？稀释涂布～初筛～复筛～选出最好的？

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9楼2015-12-01 20:09:16
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普通回帖

slwr

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
跟达尔文旅行: 金币+2 2015-12-01 12:13:34
有没有原始保存的菌种？或传代次数少的菌种？传代次数多会出现退化问题。我们实验室一般都是找最原始保存的菌种，再活化。
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2楼2015-11-30 21:57:14
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跟达尔文旅行

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by slwr at 2015-11-30 21:57:14
有没有原始保存的菌种？或传代次数少的菌种？传代次数多会出现退化问题。我们实验室一般都是找最原始保存的菌种，再活化。

老师说得从甘油管保藏的菌种中筛出高产菌，我是想请教从甘油管中可能回复突变的菌种中筛出高产菌的步骤。详细点儿的
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3楼2015-12-01 12:13:11
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tanliangzhi

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
找看看有没有之前保存传代次数少的菌种，或者试下抗生素筛选，胞内酶加IPTG没
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4楼2015-12-01 13:31:50
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跟达尔文旅行

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by tanliangzhi at 2015-12-01 13:31:50
找看看有没有之前保存传代次数少的菌种，或者试下抗生素筛选，胞内酶加IPTG没

是一种黄单胞菌，无抗生素抗性，能够鉴别的唯一指标就是底物转化率。是不是只能通过从甘油管中点菌平板划线，然后一一挑取单菌落进行发酵，测底物转化率？这样工作量是相当大啊
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5楼2015-12-01 14:05:42
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slwr

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 跟达尔文旅行 at 2015-12-01 12:13:11
老师说得从甘油管保藏的菌种中筛出高产菌，我是想请教从甘油管中可能回复突变的菌种中筛出高产菌的步骤。详细点儿的...

这个我就没做过了，我们之前是直接保存的试管，没加甘油。不好意思，帮不了你了。
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6楼2015-12-01 15:16:23
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跟达尔文旅行

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by slwr at 2015-12-01 15:16:23
这个我就没做过了，我们之前是直接保存的试管，没加甘油。不好意思，帮不了你了。...

还是谢谢你
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7楼2015-12-01 16:12:27
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xiaojiancai

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以考虑在其原始分离底物中复壮。
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知福福常在，随缘缘自来！
8楼2015-12-01 19:48:51
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wangtianjin

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
只有不停的划板，挑，接，，看运气吧，挑到高表达的算你运气好

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10楼2015-12-01 20:13:44
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