24小时热门版块排行榜    

查看: 1440  |  回复: 19
当前主题已经存档。

chysx6

铁杆木虫 (小有名气)

从来没用过生工的酶,它们给提供什么样的buffer也不清楚
给你提供下列体系供参考:
1.NEB
Enzyme Supplied NEBuffer % Activity in NEBuffers 1 2 3 4
Hind III  2            50 100 10 50
Kpn I     1 + BSA  100 75 0 50
建议使用buffer2+BSA
2.Takara
在各种Universal Buffer中的相对活性:
                 L      M    H     K    T(+BSA)
Hind III     (60) 100 <20  200   (100)
Kpn I        100  60  <20  <20  (100)
建议使用buffer M

也就是说如果你用生工的酶,应该选择它们提供的中盐buffer进行酶切
应该就是随HindIII提供的那个buffer
11楼2008-09-20 11:32:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chysx6

铁杆木虫 (小有名气)

刚提供的是双切体系,单切体系你就用随酶提供的就行啊
如果没有,看上帖
可选用NEB或Takara的替代,活性也都列出来了
12楼2008-09-20 11:35:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

figo.339

木虫 (著名写手)

说明书上有的
你那里没有说明书吗
13楼2008-09-20 12:08:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stanwang626

铜虫 (小有名气)

也可能有碱基突变了
14楼2008-09-20 19:34:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenfang20045

金虫 (小有名气)

谢谢各位!
15楼2008-09-22 21:30:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tangtl

木虫 (正式写手)

小木虫潜水者

切开不一定能看到。因为小片段太小了。。你做个对照吧。这样可以比对出来
16楼2008-09-23 10:15:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zfbhunting

新虫 (初入文坛)

知道哪个公司的的酶就去公司网站上去找   上海生工是个代理商吧  去生产这个酶的公司网站找
17楼2008-09-25 11:11:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stanwang626

铜虫 (小有名气)

做个质粒对照,看切开了没有
没切开可能是在酶切位点有碱基突变的可能
18楼2008-09-25 11:15:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silviasj

金虫 (著名写手)

考虑下是不是你得基因没有连上。
19楼2008-09-25 22:19:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zemin_fang

木虫 (正式写手)

建议先做个菌液PCR,再抽提质粒酶切,我通常酶切用TaKaRa的酶,但是我用Tango buffer
20楼2008-10-02 20:44:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 chenfang20045 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 科研孤儿太难了 +14 我4大白菜 2026-08-20 15/750 2026-08-20 22:33 by 袁向阳007
[基金申请] 让我中一个面上吧! +8 大萍1987 2026-08-20 10/500 2026-08-20 21:48 by 大萍1987
[基金申请] 言之凿凿,明天官网会通知放榜? +15 医学老男孩 2026-08-20 17/850 2026-08-20 20:35 by CaoLG
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +21 yaoyewhu2008 2026-08-20 22/1100 2026-08-20 17:03 by yaoyewhu2008
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+3 snowwithsea 2026-08-19 12/600 2026-08-20 15:56 by lfy8008
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +4 yuleib84 2026-08-19 5/250 2026-08-19 19:52 by hhs666
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +10 wangze12014 2026-08-14 12/600 2026-08-19 16:56 by 苦难博士
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候开奖? +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
信息提示
请填处理意见