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RNAi rescue不能rescue干扰后表型
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我构建了蛋白A和蛋白A RNAi resistant（siRNA对应的mRNA中密码子做了改变，导致siRNA不能干扰此蛋白，但编码的氨基酸和野生型一致）的细胞系，尽管在正常细胞或者过表达蛋白A的细胞中，干扰蛋白A（Western Blot已多次验证干扰效果很好）导致双核细胞的产生，但是在蛋白A RNAi resistant的细胞中（Western Blot已多次验证siRNA不能干扰此蛋白），但是仍然不能够rescue双核的产生。我们开始怀疑siRNA脱靶，但是文献中已有报道干扰蛋白A确实能诱导双核的产生（siRNA序列和我们的不一致）。 请问各位虫友，有人遇到过类似的问题吗？求解答！ |
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