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跑电泳，阳参跑得出来，样本却跑不出来，这是为什么啊！
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当初样本用酚氯仿提的DNA，PCR扩增的是钩端螺旋体基因组，根据GyrB设计的引物，然后扩增片段是509BP，电泳用的1.5%的胶。一开始pcr体系中模板加1微升，跑不出条带改为2微升， PCR反应体系：（25微升） 条件：初变性：94度 10min dd H2O ：19.175微升 变性：94度 30s---- 10*Buffer:2.5微升 退火：60度 30s---- dNTPs :0.2微升 延伸：72度 30s----35个循环 引物F、R：各0.5微升 后延伸：72度 10min Taq 酶：0.125微升 模 板：2微升 然后有跑出来条带，前几次还好，测出好多阳性样本，因为一直得做Pcr，所以就把提取的DNA样本放在4度冰箱，放了有2、3星期了（因为做实验期间有其他事耽搁，所以做实验的频率不太高），然后突然有一次，电泳跑不出条带了！！！！！！！Marker可以跑出条带，阳参可以跑出509Bp的条带，但是样本就是跑不出来！！！！大神求指教啊！！！！！  模板为2微升电泳正常的时候 |
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