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yly1991yd

木虫 (小有名气)

[求助] Fluo 3/AM可不可以在普通荧光显微镜下看到荧光呢

如题,小妹刚刚开始准备用Ca离子探针标记胞内Ca离子,实验基本参照网上前辈的的步骤,Fluo-3/AM最终浓度为2uM,还加了助转运的F-127终浓度为0.02%,然后37度培养了45min,洗了两遍,37度又培养了45min左右,然后在普通的荧光显微镜下没有看到荧光。
正在总结原因。不知道是操作的问题还是显微镜的问题(师姐说细胞太少了),一般看文献上都用的激光共聚焦,所以不知道普通的荧光显微镜是不是看不到啊~
求大神相助,或者做过知道步骤分享一下也可以
还有一个问题就是我买的1mM的Fluo3/AM储备液,DMSO溶的,可以反复冻融使用嘛,因为分装的话没太想好怎么分法…
谢谢啦
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这里有好多厉害的虫虫~要向他们学习(*^__^*)
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