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检测细菌产嗜铁载体的CAS培养基里的10%的酪蛋白如何配制时才能不产生沉淀？
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要检测分离的细菌是否能够产生嗜铁载体使用CAS培养基，配方如下： CAS 染液：含 1 mmol /L CAS，0.1 mmol /L FeCl3，4 mmol/L HDTMA，0.1 mol/L； pH 6.8 无机磷酸盐缓冲液：（Na2HPO4•12H2O 2.427g，KH2PO4 0.075g，NaH2PO4•2H2O 0.5905g，NaCl 0.125g，NH4Cl 0.250g，100 mL 使用时 10 倍稀释）； 每 100 mL 含 20 % 蔗糖溶液 1 mL，10 %酸水解酪素 3mL，1mmol/L CaCl2 100 μL，1 mmol /L MgSO4 2mL，琼脂 1.8g； 在约 60 ℃ 时缓慢加入无机盐溶液和 CAS 染液各 5mL，可得蓝色检测培养基。配制用水均为去离子水，制备培 养基时所用玻璃器皿须 6mol /L盐酸浸泡，用双蒸水冲洗干净； 在做实验的时候配制10%的水解酪蛋白用0.2M/L的NaoH加热溶解，然后每 100 mL 含 20 % 蔗糖溶液 1 mL，10 %酸水解酪素 3mL，1mmol/L CaCl2 100 μL，1 mmol /L MgSO4 2mL，琼脂 1.8g配制成固体培养基，其中定容时用HCL调节了培养基的pH值至7,此时培养基溶液仍为澄清，但是灭菌之后就出现了沉淀。哪位大神知道CAS培养基该如何配制才不会产生沉淀呀？ SOS SOS SOS |
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3楼2016-06-23 20:09:08
【答案】应助回帖
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你好，我现在现在做铁载体鉴定平板，请问能否告知以下内容的详细步骤; 先配制好1mmol/L的CaCl:溶液、1mmol/L的MgSO4·7H2O溶液、10%的酸水解酪蛋白溶液(121摄氏度，15min单独灭菌);再分别取0.2mL的CaCl:溶液、0.2mL的MgSO4·7H2O溶液、6mL的10%的酸水解酪蛋白溶液，加入生物缓冲液Pipes(sigma)，调pH6.8一7.0。去离子水定容到100mL。加入g2琼脂粉，121摄氏度，15min。当以上的固体培养基灭完菌后，温度降低到60摄氏度时，以5mLCAS蓝色检测液体/每100mLCAS培养基的量沿着三角瓶壁加入，混合均匀。 pipes 加多少，什么时候调节PH？ |
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