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rickyjay2014

金虫 (正式写手)

[求助] 肝癌细胞为什么传代之后会出现特化成神经细胞的状态呢?已有2人参与

之前实验室感染过支原体,不过现在修复了很久了,但是经我手养的细胞总是觉得各种不好()。求大神分析一下。
细胞类型:HePG2
培养液配比:10%四季青胎牛血清,88% 高糖DMEM(HYCOLNE), 2%双抗和谷氨酰胺(北京现代?),胰酶每次消化用2ml(北京现代? 感觉这个说的不太对呢),因为帖的太紧了,所以就用这么多,时间控制在1min30s以内。
用途:一部分放在小的培养皿里面,一部分进行传代,通常 小培养皿里面的长得还不错,但是培养瓶里的就会出现特化,感觉就会分化成各种轴突树突的样子,然后颜色不澄清,已经很多很多次出现这种情况了。
我自己猜测的原因:
1)难道是胰酶不好嘛?或者是加的量太多?但是感觉贴壁实在是太紧了,所以只能这样做了。
2)是不是之前污染过,所以就很难完全去除支原体呢?
3)细胞代数应该是很多带了,会不会本来活性就很差呢?
4)本人细胞专业研究生,最近才开始养肝癌细胞,本以为很好弄不知道为什么就这样了,好痛苦啊
求大神帮助,感激不尽~
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天天看文献,好好做实验
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djbitter

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
rickyjay2014: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-11-26 15:02:32
一种可能是细胞本身状态不好,尤其浑浊,是否污染;另外,有的实验用进口血清培养,说国产的易出现分化(细长丝状),而且有时在培养板比瓶里好,可能是瓶的问题。
2楼2015-11-24 09:09:51
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rickyjay2014

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by djbitter at 2015-11-24 09:09:51
一种可能是细胞本身状态不好,尤其浑浊,是否污染;另外,有的实验用进口血清培养,说国产的易出现分化(细长丝状),而且有时在培养板比瓶里好,可能是瓶的问题。

非常感谢呀。我再试试

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3楼2015-11-24 10:45:20
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孙小猪6666

新虫 (初入文坛)

楼主,情况解决了吗,求助

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4楼2017-10-19 14:38:30
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atto-bio

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

使用德国爱拓生物最新推出的含肝组织特异性基质成分细胞培养添加剂,细胞状态将明显改善。
5楼2017-12-08 23:32:32
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