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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 关于“Ames试验的发光测定法（工程菌法）”的几个问题
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zhqq2010

银虫 (正式写手)

[求助] 关于“Ames试验的发光测定法（工程菌法）”的几个问题 已有1人参与

Ames试验的发光测定法（工程菌法）

(1)一般样品的检测
①增菌培养：用接种针挑取少量菌苔接种于50mL的培养基中（含氨苄西林和氯霉素，终浓度均为25μg/mL。但对菌株LZ18则为四环素和氯霉素，终浓度分别为2μg/mL和25μg/mL), 37℃ 200r/min振摇过夜。取10mL菌液接入100mL肉汤培养基中，继续振摇2-3h，使培养物保持对数期生长

问题：
1.增菌培养的目的是什么？
2.培养基中为什么加入含氨苄西林和氯霉素等抗生素？
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1楼 2015-11-21 21:02:20
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maxiaoyan84

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhqq2010 at 2015-11-24 20:38:07
请问这一步骤 中 ”加入氯霉素“ 的原因 是什么？ Ames试验的发光测定法

②发光基因（Lux基因）鉴定
在营养肉汤培养基中加入氯霉素，使终浓度为25μg/mL。
接入对数期的待测菌株的培养物，37℃培养24h，取1 m ...

加入氯霉素和加安比西林的原因是一样的。
你的细菌有lux基因？顺便问一下从哪里买的？我用的是普通的细菌，木有lux基因，你用l带有ux的细菌做的效果怎么样？
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4楼2015-12-04 11:41:51
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maxiaoyan84

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhqq2010: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-11-24 20:35:56
增菌培养的目的就是像你说的，为了使细菌处于对数期。培养基中的安比西林和氯霉素是筛掉细菌繁殖过程中丢掉质粒的细菌，看看实验原理就清楚了。
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2楼2015-11-23 08:47:42
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zhqq2010

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by maxiaoyan84 at 2015-11-23 08:47:42
增菌培养的目的就是像你说的，为了使细菌处于对数期。培养基中的安比西林和氯霉素是筛掉细菌繁殖过程中丢掉质粒的细菌，看看实验原理就清楚了。

请问这一步骤 中 ”加入氯霉素“ 的原因 是什么？ Ames试验的发光测定法

②发光基因（Lux基因）鉴定
在营养肉汤培养基中加入氯霉素，使终浓度为25μg/mL。
接入对数期的待测菌株的培养物，37℃培养24h，取1 mL培养的菌液，加入测量杯中，加入50 μL癸[guǐ]醛液，充分混匀置测光仪中检测发光。
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3楼2015-11-24 20:38:07
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zhqq2010

银虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by maxiaoyan84 at 2015-12-04 11:41:51
加入氯霉素和加安比西林的原因是一样的。
你的细菌有lux基因？顺便问一下从哪里买的？我用的是普通的细菌，木有lux基因，你用l带有ux的细菌做的效果怎么样？...

你好！我没有做过这个实验。现在只是在研究实验步骤。实验的具体细节我从来没有接触过。
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5楼2015-12-06 17:55:34
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