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hong1719

新虫 (初入文坛)

[交流] 请教各位老师,如图,细胞是否老化,有无补救方法 已有3人参与

请教各位老师,如图,肺癌A549细胞

之前养师兄的A549,细胞状态很好,但是停了一段时间后传另一个同学的A549细胞,感觉就是这样,完全做不了实验,表现在细胞复苏时还尚可,养着养着传个两三代后就开始变差,越来越多的坏死细胞,多核大细胞,不能贴壁皱缩但不漂浮的濒死细胞(小白泡)。

同课题组的师兄师姐传来的同一批细胞也是这样。

尝试过用胰酶部分消化,能筛除掉不少贴壁很紧的多核大细胞和贴壁很松的濒死小白泡细胞。但是重新养很快又会出现类似状况

现在细胞还没加药就死一片,一个肿瘤细胞搞得感觉比非永生细胞还脆弱。没死的也状态各异,上次做一个免疫荧光,结果一个视野什么奇形怪状的细胞都有,有正常的,有凋亡的,有坏死的,郁闷死了。

请问各位老师,这就是细胞老化的表现吗?除了换细胞有没有什么补救方法?
(蓝色箭头标记的坏死的巨细胞,传代超过五代后这样的细胞200x下一个视野平均都有10个以上。真崩溃了)

请教各位老师,如图,细胞是否老化,有无补救方法
细胞状态.jpg
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asiasshuang

银虫 (小有名气)


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换血清吧,血清不行
2楼2015-11-18 17:27:14
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pipadou

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
请问这个问题你解决了吗?如何解决的?
3楼2015-11-29 20:03:25
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liuyan_54321

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
怀疑这个细胞当时冻存时或是复苏时有问题,冻存时应该是程序化降温,复苏时要快速融化,建议重新复苏一批冻存的细胞;或是你的血清有问题,血清用之前要灭活过滤,血清不是太好的话,可以适当提高培养基中血清的量
4楼2015-12-01 14:06:23
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