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honger982896

银虫 (初入文坛)

[交流] 求含重组质粒菌的保藏问题???谢谢

我的重组质粒菌因为经常用,故用摇过夜的菌液放在4度保存,但是用来表达时开始表达还好,可后来用同样的菌来表达就表达不出来了,我怀疑是菌液放太久了的原因。。。。各位是怎么包藏的呀?望不惜赐教????
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cdl007

木虫 (正式写手)

多次传代繁殖后质粒可能会丢失

可以在第一次做好后,冻存一些管,每次用取一管现摇
-20或-70冻存都可以
2楼2008-09-15 17:08:14
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fengmanlou

金虫 (小有名气)

wwf

楼上说的对,冻存一批,看你每次需要量小管分装,一般放在-80度里,用时取一管!
时间太常的话要重新筛菌!
wwf
3楼2008-09-15 20:43:15
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xiaoyadxy

金虫 (小有名气)

同意楼上的看法,我们是在第一次做好后,用甘油保藏的,--70冻存。具体方法是将保藏菌种培养液直接与经灭菌的甘油混合,使甘油的终浓度在10%~15%,再分装于小离心管中,置于--70低温冰箱中保藏。可以长期保存的。
4楼2008-09-15 22:01:04
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