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如婳Sunshine

新虫 (初入文坛)

[求助] RNA检测 已有3人参与

染毒(重金属)水稻叶RNA
1.5%琼脂糖胶,TAE缓冲液配制
样品处理:RNA加上样缓冲液
电压:125V
为什么会出现这么多杂带?我看网上的一半都只有18S和28S两条带啊,是RNA部分降解了吗?
这样的RNA还能用吗?
Ps:做RT-PCR时,逆转录后得到的cDNA稀释吗?还是在提取出的RNA那一步就稀释后再使用?这两者有什么区别?
新手求解,谢谢各位大神~

RNA检测


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schkk

至尊木虫 (正式写手)

点个marker看看是不是基因组DNA没除去

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2楼2015-11-15 15:14:17
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草溪河

铁虫 (著名写手)

最上面的条带可能是DNA,下面的RNA条带很好,有很多种RNA。

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3楼2015-11-15 15:21:42
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gzbjzjchen

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
28 5 18 5.8 可以用的不用在意,

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4楼2015-11-15 16:09:01
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by 草溪河 at 2015-11-15 15:21:42
最上面的条带可能是DNA,下面的RNA条带很好,有很多种RNA。

上面那条不会是DNA的,太小了

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5楼2015-11-15 17:44:39
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

RNA提的很不错了,条带清晰,没有DNA,可以直接做下一步了,什么2:1之类的都算了

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6楼2015-11-15 17:46:10
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豆子的星空

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
如婳Sunshine: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2015-11-18 01:41:06
可以用,不过是有些杂带,但是做反转录是不影响结果的!不过还是建议提取更好的RNA。cDNA用时不用稀释,少加点就行了,我是这么做的,也从来没影响过效果!主要是人懒了一些。。。。
Idobelieve
7楼2015-11-17 20:56:31
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wang7x7x

金虫 (小有名气)

水稻叶子提取总RNA都是这样的,你提得不错。貌似那会老师给我的解释是叶绿体的影响
生活
8楼2015-11-18 16:38:40
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cold_blood

金虫 (小有名气)

做RT-PCR时,逆转录后得到的cDNA稀释吗?还是在提取出的RNA那一步就稀释后再使用?这两者有什么区别?
生活,不是看你有什么,而是看你要什么。
9楼2016-01-18 22:17:26
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biotech_zhou

木虫 (著名写手)

待人以诚:专业/专注/专心

高品质2×逆转录MIX,操作方便简单,RT反应只需加入模板和水,免费试用申请进行中,有意请PM哦······
年末优惠荧光定量pcr、WB、ELISA技术服务一律六折!交流锤炼知识,用心构筑桥梁,以更优质的产品及技术服务助力科研;QQ:2513165427;Email:b
10楼2016-04-25 17:03:23
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