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weiwokaoyan

银虫 (著名写手)

[求助] 如何确定双水相萃取体系的浓度 已有2人参与

本人在做双水相萃取蛋白,用的PEG和KHP两相,但是不知道如何确定两相的浓度,比如16%PEG和18KHP,是直接配制吗还是如何得出。求大神帮助,具体怎么操作????
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hc2015

新虫 (小有名气)


【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
weiwokaoyan: 金币+2 2015-11-21 21:00:47
sytucom: 麻烦回答虫子的提问,非常感谢 2015-12-02 15:35:17
陪好水相,逐渐加另一项来实验确定。比如配好50%的PEG溶液,逐渐加KHP高浓度缓冲液,或者直接加固体,观察确定,搅拌不要太聚烈,很容易乳化的。祝顺利
2楼2015-11-16 10:42:45
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
weiwokaoyan(sytucom代发): 金币+1, 多谢参与 2015-12-02 15:34:44
建议楼上的做法,试试,基本都这么操作的,不同物质的分配不一样,所以这个要自己试验,祝顺利。
3楼2015-11-16 11:54:59
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weiwokaoyan

银虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hc2015 at 2015-11-16 10:42:45
陪好水相,逐渐加另一项来实验确定。比如配好50%的PEG溶液,逐渐加KHP高浓度缓冲液,或者直接加固体,观察确定,搅拌不要太聚烈,很容易乳化的。祝顺利

还不是太懂,逐渐加怎么计算浓度啊?具体应该是质量比吧,我是这样做的比如16%PEG,18%磷酸盐,称取1.6gPEG,1.8gl磷酸盐,一定量的粗蛋白,加水使终质量为10g。可是要做单因素实验,18%,20%之类的,这样操作感觉不是太精确该复杂。刚开始接触双水相萃取,所以想知道更精确、具体的操作步骤。。。
4楼2015-11-16 18:48:18
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weiwokaoyan

银虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by hc-material at 2015-11-16 11:54:59
建议楼上的做法,试试,基本都这么操作的,不同物质的分配不一样,所以这个要自己试验,祝顺利。

还想请教一下您,萃取后如何把PEG与目标蛋白分开啊?
5楼2016-03-15 14:31:41
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