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lovezhe

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
第一种好点,两种其实都可以,看对数期就好了

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11楼2015-11-19 15:57:06
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MarchZR

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
细胞计数法绘制细胞生长曲线
基本操作
1.取生长良好的细胞,用胰蛋白酶消化,离心
2.离心后去上清,加入新鲜适量的培养基重悬细胞,使之成为单细胞悬液
3.按照一定的倍数稀释该单细胞悬液,稀释倍数以稀释结果细胞数在20-200之间为合适倍数
4.准备血球计数板,洗净晾干
5.吸取一定量的细胞悬液,加样到血球计数板上,显微镜下计数
6.按照血球计数板的计数原理进行细胞计数(参考细胞培养(http://www.detaibio.com/topics/cell-culture-faq.html)-血球计数板的原理)
7.计算细胞总数, 调整细胞至一定浓度(1x105/ml)。细胞浓度=细胞计数板得到的细胞数量/4x稀释倍数x104/ml
8.细胞再培养,准备24孔板,每孔中加入0.1ml的细胞(即1x104个细胞)和0.9ml的细胞培养基,轻轻晃动孔板(十字方向晃动),使细胞分布均匀,并进行常规细胞培养(48h后换液培养)
9.培养48h后,即可每过24h取样一次,每次取样至少取3个孔的细胞,多次计数取平均值,提高准确性),取样细胞常规胰蛋白酶消化,制备单细胞悬液,显微镜下进行细胞计数
10.计数结果,以时间(d)为横坐标,细胞数为纵坐标,绘制细胞生长曲线
因为只是针对细胞,细胞还未开始瞬时表达,绘制生长曲线
12楼2015-11-27 16:39:32
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微笑的鱼135

新虫 (初入文坛)


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引用回帖:
10楼: Originally posted by zzulsylsy at 2015-11-19 13:43:26
我做乳酸菌,两种方法都用过:1、将斜面上的菌落用生理盐水全部冲洗下来后按一定的比例进行接种 2.有时直接将发酵液与甘油混合后冻干保藏到10ml的离心管中,每管含有一定体积的发酵液,直接用做好的甘油种子管按照 ...

在紫外光多少纳米呢,然后菌数与od的关系是什么

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13楼2016-04-11 14:30:38
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微笑的鱼135

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by zzulsylsy at 2015-11-19 13:43:26
我做乳酸菌,两种方法都用过:1、将斜面上的菌落用生理盐水全部冲洗下来后按一定的比例进行接种 2.有时直接将发酵液与甘油混合后冻干保藏到10ml的离心管中,每管含有一定体积的发酵液,直接用做好的甘油种子管按照 ...

可以留个联系方式吗,目前要做乳酸菌的生长曲线,有疑问,OD与菌密度关系,在多少纳米处测

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14楼2016-04-11 14:46:46
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wonder0909

金虫 (小有名气)


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每隔一定时间间隔测OD值,当初熬夜测得,每隔4或6h
15楼2016-04-11 21:06:31
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阿芙佳朵

新虫 (初入文坛)

我也用的第一种。
16楼2016-04-28 18:14:35
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yaomanxiao

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
将菌液按一定接种量接到液体培养基,每隔一定时间测OD

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17楼2016-04-30 08:34:38
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请叫我学术帝

铜虫 (小有名气)


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引用回帖:
5楼: Originally posted by crayoon at 2015-11-18 08:49:26
你说的这两种方法其实都可以。采用哪种方法,我觉得要看你以后培养过程中使用液体接种还是平板接种。如果以后培养接的摇瓶比较多,那用液体接种方便一些,如果摇瓶少,从平板接也比较方便。另外,我觉得液体接种平 ...

如果是摇瓶实验测生长曲线?每次取样都会消耗一部分,虽然少量,但是这样会不会影响最后的结果?如何规避呀?
叫我学术帝
18楼2016-05-02 13:28:16
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子非鱼time

新虫 (初入文坛)


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楼主,问题最后解决了吗?我测大肠杆菌生长曲线,都8个多小时了,吸光度还是没什么变化。有些问题想请教一下
做自己热爱的,然后坚持下去
19楼2017-11-19 21:55:39
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