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苏三加油没

木虫 (初入文坛)

[求助] 冰冻切片蔗糖脱水沉底 已有2人参与

在制作冰冻切片过程当中,我取了两个大小质量差距比较大的组织,在4%PFA过夜后,进行蔗糖脱水,30%的蔗糖溶液,然后1小时后两个组织在蔗糖溶液中都沉底了,我之前做过是过几个小时后才发现组织会沉底,这个是什么原因?我的PBS是有半年没有用,会对实验结果有影响吗?我在网上查过,可以先20%蔗糖然后梯度上升脱水,那组织已经侵入到30%还可以放到20%蔗糖里吗?谢谢!
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生而无憾,活得精彩
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hoyeung

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖

不影响,蔗糖脱水结果好就是要让组织沉底。时间的长短跟组织的性质,大小都有关系的。
2楼2015-12-11 11:21:17
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lipenix

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

理论上说,应该是先从低浓度蔗糖开始,逐渐增加浓度,做了多年直接使用30%蔗糖的,也没有明显差异,现在偷懒,都直接使用30%的蔗糖了。
蔗糖会逐渐渗透入细胞间,并增加组织的比重,所以组织间隙被蔗糖填充后一定会沉底的,包括最难沉底的肺组织(肺泡中多少都有些气泡,很难沉),所以我们经常用肺组织沉底,来判断蔗糖有没有渗透彻底。
祝 好运~!
3楼2019-01-26 18:26:35
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水产江

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lipenix at 2019-01-26 18:26:35
理论上说,应该是先从低浓度蔗糖开始,逐渐增加浓度,做了多年直接使用30%蔗糖的,也没有明显差异,现在偷懒,都直接使用30%的蔗糖了。
蔗糖会逐渐渗透入细胞间,并增加组织的比重,所以组织间隙被蔗糖填充后一定会 ...

求助。组织块放进30%蔗糖溶液里,直接沉底了。是什么原因

发自小木虫Android客户端
4楼2019-07-05 16:12:16
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