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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » 免疫荧光抗体反复冻融了3次，好担心。。。
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猫薄荷9143

新虫 (初入文坛)

[求助] 免疫荧光抗体反复冻融了3次，好担心。。。 已有3人参与

买的FITC标记的免疫荧光抗体，拿回来的时候是冻着的，我就直接扔-20了，过了一段之后需要用，就拿出来稀释了一部分之后把稀释液分装了，其他的又冻在了-20。
好吧我傻了，因为以前老师做的时候就是按照这个稀释度，我就没多想。
结果发现荧光特别暗，几乎看不见。不得已又拿出来全部分装成小包装，取了两管做了一次（缩小了稀释度），感觉略暗，但是好多了。剩下的半个月之内不做所以又放回-20冻着了。
这样以后我再做的时候就相当于抗体的第三次冻融，好担心啊。既然冻融两次做出来的结果还行那么第三次会突然很烂吗？担心。。。五千多块的抗体，要是用不成了是要以死谢罪了吗。。。
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1楼 2015-11-11 15:52:44
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猫薄荷9143

新虫 (初入文坛)
因为抗体说明书上写的4度短期保存，两周左右貌似是，怕长时间不用，想不起来了就失效了，所以总放在-20.。。。
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2楼2015-11-11 15:54:07
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猫薄荷9143

新虫 (初入文坛)
话说正常情况下，也就是脑子不抽的情况下，我肯定也是拿回来之后先放-20，第一次需要用的时候拿出来分装，然后再把小包装的冻起来，以后用的时候每次拿一小管，这样算一下其实也要反复冻融两次啊，所以突然觉得就多一次影响应该也没那么大吧。。。
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3楼2015-11-11 16:50:10
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vivd娟

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不要纠结了，事已至此，没办法了，况且不一定结果就很差了
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4楼2015-11-12 15:47:58
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猫薄荷9143

新虫 (初入文坛)
有没有相似经历的同学，求安慰，这周就要做了，心里很不安。。。
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5楼2015-11-16 10:56:46
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smile_37du

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

反复冻融确实不好，一般在从公司买的时候就先让他们分装成小管了，老师没分装，所以你自己也不用心里压力这么大
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6楼2015-11-19 10:45:22
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biocherry

铁虫 (正式写手)
应该没有问题的，下次注意就好。?

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7楼2015-11-22 13:39:19
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sky蒲公英

版主 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

抗体在低温下保存，会受到影响的。不过-20短期保存应该没事的。我们以前做的时候也放过-20的，结果影响不大。

发自小木虫Android客户端
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知识就像蒲公英的花儿一样，播种在世界的每一个角落。
8楼2015-11-22 17:54:47
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猫薄荷9143

新虫 (初入文坛)
谢谢楼上的各位！
好啦，做了三次了，都没有问题，抗体可以用而且做出来效果挺不错，没有那么可怕，给以后有相同问题的同学作参考，不要过分担心了，不过以后一定要注意啦。
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9楼2015-11-30 10:07:05
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