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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » Tcricine-SDS-PAGE求助
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晴紫兰

新虫 (小有名气)

[求助] Tcricine-SDS-PAGE求助 已有4人参与

各位虫友，打算用Tcricine-SDS-PAGE跑分子量比较小的肽，要从头学习，希望各位大神指导一下。现在看文献有几个问题想要请教一下，加入致密胶之后是紧接着加夹层胶还是等一段时间凝了之后再加？若是等致密胶凝了之后再加夹层胶，那么每次加完胶后都要进行水封吗？加入的各种胶的量有要求吗？比如我配了3ml致密胶，1.5ml夹层胶，1.8ml浓缩胶，灌胶的时候要全都加进去吗？跑电泳的时候电压多少比较合适？看了几篇文献都不太一样。希望大神们帮忙解答一下困惑。另外有没有比较好的文献推荐一下。小女子将不胜感激！！！！！！！！
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1楼 2015-11-11 15:29:17
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奇葩博士

禁虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
晴紫兰: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-11-12 08:59:11
sytucom: 金币+2, 鼓励新虫参与 2015-11-19 15:01:47
本帖内容被屏蔽
2楼2015-11-11 17:13:52
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furongzhen

新虫 (小有名气)
这是要纯化小肽的节奏呀，祝福

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3楼2015-11-11 18:57:25
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furongzhen

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 晴紫兰 at 2015-11-12 08:58:41
主要是想要测分子量...

看你的系列帖子就以为食源肽的制备，分离

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6楼2015-11-12 09:02:19
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普通回帖

晴紫兰

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 奇葩博士 at 2015-11-11 17:13:52
最上面要封胶，电压先低后高，高的时候到250V也没有关系，只是跑的快慢问题

那配好的胶加多少量有什么要求呢？
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4楼2015-11-12 08:57:43
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晴紫兰

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by furongzhen at 2015-11-11 18:57:25
这是要纯化小肽的节奏呀，祝福

主要是想要测分子量
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5楼2015-11-12 08:58:41
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遥控器68

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
晴紫兰(sytucom代发): 金币+2, 感谢应助，希望继续关注楼主回复，多谢 2015-11-19 15:01:24
我之前制胶是每次每层都水封，跑胶用的恒流，应该根据胶来计算电流大小，自己用的是经验值。效果还不错，10kD一下都能成清晰条带不弥散。

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7楼2015-11-12 09:09:19
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遥控器68

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
晴紫兰: 金币+1 2015-11-13 11:52:25
我之前制胶是每次每层都水封，跑胶用的恒流，应该根据胶来计算电流大小，自己用的是经验值。效果还不错，10kD一下都能成清晰条带不弥散。

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8楼2015-11-12 09:09:19
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晴紫兰

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by furongzhen at 2015-11-12 09:02:19
看你的系列帖子就以为食源肽的制备，分离
...

是它俩太相近了吗？还是我表述的不太清楚
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9楼2015-11-13 11:50:44
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晴紫兰

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 遥控器68 at 2015-11-12 09:09:19
我之前制胶是每次每层都水封，跑胶用的恒流，应该根据胶来计算电流大小，自己用的是经验值。效果还不错，10kD一下都能成清晰条带不弥散。

怎么根据胶来计算电流大小啊？我只知道可以恒压，原来也可以恒流啊，长见识了又
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10楼2015-11-13 11:52:14
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