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晴紫兰

新虫 (小有名气)

[求助] Tcricine-SDS-PAGE求助已有4人参与

各位虫友,打算用Tcricine-SDS-PAGE跑分子量比较小的肽,要从头学习,希望各位大神指导一下。现在看文献有几个问题想要请教一下,加入致密胶之后是紧接着加夹层胶还是等一段时间凝了之后再加?若是等致密胶凝了之后再加夹层胶,那么每次加完胶后都要进行水封吗?加入的各种胶的量有要求吗?比如我配了3ml致密胶,1.5ml夹层胶,1.8ml浓缩胶,灌胶的时候要全都加进去吗?跑电泳的时候电压多少比较合适?看了几篇文献都不太一样。希望大神们帮忙解答一下困惑。另外有没有比较好的文献推荐一下。小女子将不胜感激!!!!!!!!
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奇葩博士

禁虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
晴紫兰: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-11-12 08:59:11
sytucom: 金币+2, 鼓励新虫参与 2015-11-19 15:01:47
本帖内容被屏蔽

2楼2015-11-11 17:13:52
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furongzhen

新虫 (小有名气)

这是要纯化小肽的节奏呀,祝福

发自小木虫Android客户端
3楼2015-11-11 18:57:25
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furongzhen

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 晴紫兰 at 2015-11-12 08:58:41
主要是想要测分子量...

看你的系列帖子就以为食源肽的制备,分离

发自小木虫Android客户端
6楼2015-11-12 09:02:19
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普通回帖

晴紫兰

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 奇葩博士 at 2015-11-11 17:13:52
最上面要封胶,电压先低后高,高的时候到250V也没有关系,只是跑的快慢问题

那配好的胶加多少量有什么要求呢?
4楼2015-11-12 08:57:43
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晴紫兰

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by furongzhen at 2015-11-11 18:57:25
这是要纯化小肽的节奏呀,祝福

主要是想要测分子量
5楼2015-11-12 08:58:41
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遥控器68

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
晴紫兰(sytucom代发): 金币+2, 感谢应助,希望继续关注楼主回复,多谢 2015-11-19 15:01:24
我之前制胶是每次每层都水封,跑胶用的恒流,应该根据胶来计算电流大小,自己用的是经验值。效果还不错,10kD一下都能成清晰条带不弥散。

发自小木虫Android客户端
7楼2015-11-12 09:09:19
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遥控器68

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
晴紫兰: 金币+1 2015-11-13 11:52:25
我之前制胶是每次每层都水封,跑胶用的恒流,应该根据胶来计算电流大小,自己用的是经验值。效果还不错,10kD一下都能成清晰条带不弥散。

发自小木虫Android客户端
8楼2015-11-12 09:09:19
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晴紫兰

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by furongzhen at 2015-11-12 09:02:19
看你的系列帖子就以为食源肽的制备,分离
...

是它俩太相近了吗?还是我表述的不太清楚
9楼2015-11-13 11:50:44
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晴紫兰

新虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 遥控器68 at 2015-11-12 09:09:19
我之前制胶是每次每层都水封,跑胶用的恒流,应该根据胶来计算电流大小,自己用的是经验值。效果还不错,10kD一下都能成清晰条带不弥散。

怎么根据胶来计算电流大小啊?我只知道可以恒压,原来也可以恒流啊,长见识了又
10楼2015-11-13 11:52:14
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