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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 氮平衡实验中利用气相测氮气的问题
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公羽

新虫 (初入文坛)

[求助] 氮平衡实验中利用气相测氮气的问题 已有1人参与

利用气相测菌产生的氮气 用的100mL厌氧瓶 装30mL菌夜培养基 顶空体积80mL左右 暴纯氧后进行实验 中间 末尾用针取250微升进气相检测
利用外标法，高纯氮测了标线，利用峰面积算出氮气的体积分数，但算出来大了2个数量级。。具体算法是这样的

比如末尾样 根据峰面积 算出 氮气体积分数为13.79%，则厌氧瓶中产生的氮气为80*13.79%=11.032mL，那么氮气的质量为 11.032*28/22.4=13.79mg
则氮气浓度为 13.79/30=460 mg/L
但我初始的氨氮才32mg/L啊。。

氮平衡
        氨氮    硝氮   亚硝氮    氮气   细胞内氮（单位均为mg/L）
oh   31.49    0          0            0           1.95
36h 18.59    0        0.0105    ？           7.02

理论值应该在10左右吧。。
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1楼 2015-11-10 10:04:07
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yuyuwuxin

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
公羽: 金币+30, ★有帮助 2016-03-09 09:08:46
个人感觉你应该算含量而不是算浓度，你算了氨氮硝酸氮的浓度，但是你的氨氮和硝酸氮是在水溶液中的，你的氮气浓度是在顶空的空间内的这个浓度和液体里的浓度是不对等的啊，我以前也做过这种实验，是按含量算的氮平衡，误差在8%左右，还有个问题你把气体暴纯氧后只用P-Q柱氧气峰和氮气峰重合
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2楼2015-11-10 11:09:24
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yuyuwuxin

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你也可以尝试采用过硫酸钾法测一下培养前后的总氮，做氮平衡
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3楼2015-11-10 11:12:09
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公羽

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yuyuwuxin at 2015-11-10 11:09:24
个人感觉你应该算含量而不是算浓度，你算了氨氮硝酸氮的浓度，但是你的氨氮和硝酸氮是在水溶液中的，你的氮气浓度是在顶空的空间内的这个浓度和液体里的浓度是不对等的啊，我以前也做过这种实验，是按含量算的氮平衡 ...

其实是一样的啊 因为我浓度都是除以培养液的体积 单纯算质量的话
初始总氮为 （31.49+1.95） mg/L*30mL=1.0032 mg
那跟算出来产生的氮气有13.79 mg 也不是一个数量级的啊。。
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4楼2015-11-15 08:55:41
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yuyuwuxin

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 公羽 at 2015-11-15 08:55:41
其实是一样的啊 因为我浓度都是除以培养液的体积 单纯算质量的话
初始总氮为 （31.49+1.95） mg/L*30mL=1.0032 mg
那跟算出来产生的氮气有13.79 mg 也不是一个数量级的啊。。...

建议你多做几次，最好能直接测总氮，不要用氨氮，硝基氮，亚硝基氮加起来算，你也可以看看三种形式的氮和直接测得总氮是不是平衡的，牵涉到气的东西多数不准，还有种情况就是你这么知道你的菌就只产生氮气呢？有可能产生一氧化二氮和一氧化氮呢，这都是氮代谢的中间产物，还有瓶子里的气体产生会产生气压会不会把气体压缩了呢。。。。想到这些我觉得你也快凌乱了吧
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5楼2015-11-16 09:03:42
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公羽

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by yuyuwuxin at 2015-11-16 09:03:42
建议你多做几次，最好能直接测总氮，不要用氨氮，硝基氮，亚硝基氮加起来算，你也可以看看三种形式的氮和直接测得总氮是不是平衡的，牵涉到气的东西多数不准，还有种情况就是你这么知道你的菌就只产生氮气呢？有可 ...

是啊 一氧化二氮我有测 中间有产生之后消失 一氧化氮和二氧化氮不好说
总氮测法我也知道 但是我希望能测出来气态氮的含量这样比较有说服力 有氮转化为气态氮这个是肯定的 气压问题的话 我就没办法了 但感觉不会差那么多的 两个大气压就不得了 况且产生氮气消耗了氧气 正压不多 取样的时候看得出来 不会差到100倍
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6楼2015-11-17 11:12:25
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yuyuwuxin

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by 公羽 at 2015-11-17 11:12:25
是啊 一氧化二氮我有测 中间有产生之后消失 一氧化氮和二氧化氮不好说
总氮测法我也知道 但是我希望能测出来气态氮的含量这样比较有说服力 有氮转化为气态氮这个是肯定的 气压问题的话 我就没办法了 但感觉不会差 ...

你比较过总氮的损失和氮气的关系吗？
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7楼2015-11-18 11:28:58
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公羽

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by yuyuwuxin at 2015-11-18 11:28:58
你比较过总氮的损失和氮气的关系吗？...

我觉得没必要吧，因为现在不是氮气算出来不够，是多太多了…

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8楼2015-11-18 22:23:05
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婷宝宝2013

银虫 (小有名气)
楼主你好，本人刚开始接触研究发酵过程中微生物的氮转化过程，想判断下到底有无气态氮生成，但定性观察气泡没看出了，因为做的是好氧条件，定量测氮气又不好测，麻烦问问你细胞内氮你是怎么测的啊？想着测下总氮和各个氮含量差值来看看。
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9楼2017-04-06 20:58:46
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