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wzc45098

铁虫 (小有名气)

[交流] 引物设计求助

PCR的时候总是有二聚体,换了很多种方法,是不是引物不行呢,请大家帮帮忙,急得不行了。。。。。。。。。
            atggagaaaa ttgaggtcag tattatttcc cgagacacca ttaaaccatc agctgcttcc
       61 tcttcactac acccttacaa gctttccatc atcgatcagt tcactcccac aacgtatttc
      121 ccagttatat tcttctaccc cattactgac cgtgtcttca atcttcctca aaccttaacc
      181 gacttgaaaa acactgtttc ccaggctctc actttgtacc atccactctc cgggaggata
      241 aaaaacaacc tatacattga tgatttcgaa gcaggcatcc cctaccttga   ggcccgagtg
      301 aattttcaca tgattgattt tctaaggctt ccgaaaatcg agtggctaaa tgagtttgtt
      361 ccaatggctc catatcgcaa ggaaacaata tctgagtttc ttcccttgct tggaattcaa
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      481 ggccaaacgg caagctgttt tctcaagtcc tgggttgcta tttttcgtgg gtatcgtaac
      541 aaaatcatac atcctaatct ctctcaagct gcattacttt tgccatcgag ggatgacttg
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      661 aggagatttg tatttgatgc gaaagccata tccgcacttc aagatgaagg gaagagcgaa
      721 tacgtgccca agccatcacg tgttcaggcc ctcactggtt ttctctggaa acatcaactc
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     1081 gaagaaggga gttttgtaga accagcacca gagttttatt cattctcaag ctggactaga
     1141 ttttttgacc aagttgattt tggatggggg aggccatctt gggttggatt ctcggggaga
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     1321 tttgcatctc caaacccccg aatttcaata gcctcttcag ttggtatgga ttaa

引物
5-CATCAACTCGCTGCTTCT-3
5-CATATCCCTCTTTACCCT-3
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shuijing415

金虫 (小有名气)

你在利用软件设计引物的时候它会提醒你是否有二聚体出现的.
2楼2008-09-12 14:54:28
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wzc45098

铁虫 (小有名气)

没错 我设计的时候会尽量避免二聚体的出现 可还是有 不知道是怎么回事了
3楼2008-09-12 16:00:19
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qgaoamtf

至尊木虫 (职业作家)

有二聚体也没有关系,只要有目的产物就可以。目测你的引物无二聚体,是否调整PCR条件? 下游引物的设计也似乎不好。
4楼2008-09-12 18:32:54
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