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blacksoul

新虫 (初入文坛)

[求助] 有做过用超高速离心机做蛋白结合率的吗？求教 已有2人参与

本人最近做一个药的蛋白结合率，由于脂溶性太强，用超滤法和平衡透析法都做不出来，所以想用超高速离心机直接分离蛋白试试，有虫友做过这个吗？转速啥的我不大清楚，求指点！！！
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1楼 2015-11-09 13:50:45
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haoruijia8

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我曾经做过这个试验，想要使用超离法进行蛋白结合率的分析对仪器要求很高，我当时用的是100000g的离心力，30min,效果不是很理想，另外一个就是超离法可能形成的蛋白梯度问题，可能会影响你蛋白结合率结果的重现性，对操作要求也很高
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3楼2015-12-10 16:49:14
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总有二狗咬朕

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1.脂蛋白的纯化可用稀的去垢剂溶液如十二烷基硫酸钠、洋地黄皂苷溶液或有机溶剂来抽提。
2.蛋白经过超高速离心根据密度不同将脂蛋白分为乳糜微粒、极低密度脂蛋白、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白和及低密度脂蛋白的代谢中间产物中间密度脂蛋白。楼主可以试试4000rpm*3，然后看看分离情况，不行就加大转速。
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我好累，承受这个年纪不该有的帅！
2楼2015-11-09 14:26:07
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blacksoul

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by haoruijia8 at 2015-12-10 16:49:14
我曾经做过这个试验，想要使用超离法进行蛋白结合率的分析对仪器要求很高，我当时用的是100000g的离心力，30min,效果不是很理想，另外一个就是超离法可能形成的蛋白梯度问题，可能会影响你蛋白结合率结果的重现性， ...

好的，谢谢，请问你有看过相关文献用的是这个方法吗

发自小木虫IOS客户端
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4楼2015-12-11 08:35:10
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