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lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 关于融合PCR已有1人参与

大家好:我现在手上有一个基因的两段,一个2.1kb,一个500bp左右。中间有150bp的重合区段,我想在想融合这两部分,做融合PCR,请问各位,有什么特别的PCR程序吗?两个片段的比例大约加多少啊?谢谢各位了。
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迷路人啊

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
分两次
第一次扩增五个循环,不加引物只加两个片段。结束之后接着加上两端引物扩增25个循环就OK
6楼2015-11-12 15:46:54
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sunshine436

新虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-11-09 22:19:22
lwk5716: 金币+5, 谢谢你! 2015-11-10 00:06:34
设两个程序,第一个延伸时间按短片段500,退火温度地点,45度吧,不用延长,第二个就是正常的程序2600.比例摩尔数1:1

发自小木虫Android客户端
3楼2015-11-09 19:02:03
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sunshine436

新虫 (小有名气)

第一个程序加两端引物,要快

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4楼2015-11-09 19:03:19
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sunshine436

新虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
lwk5716: 金币+4 2015-11-10 17:22:19
第一程序结束后加两端引物

发自小木虫Android客户端
5楼2015-11-09 19:04:12
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