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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » pcr 中的一些问题 求助
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daniel867

[交流] pcr 中的一些问题 求助

我做pcr扩增2000多bp的片段，阳性对照都出来了，可是我的样品总扩不出来，哪位高手能帮我指点一下，不胜感激
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1楼 2008-09-11 23:14:45
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)
调整镁离子浓度 做一个梯度
退火温度也做一个梯度
换扩增能力高的酶试试
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2楼2008-09-12 09:28:01
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boouy

银虫 (正式写手)
如果模板质量确定没有问题，而引物序列也正确无误，则降低退火温度最有效。
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3楼2008-09-12 10:15:47
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daniel867

引用回帖:
Originally posted by snzydong at 2008-9-12 09:28:
调整镁离子浓度 做一个梯度
退火温度也做一个梯度
换扩增能力高的酶试试

谢谢指点。那么镁离子浓度每个梯度降低多少比较好啊？
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4楼2008-09-12 11:09:36
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