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daniel867

[交流] pcr 中的一些问题 求助

我做pcr扩增2000多bp的片段,阳性对照都出来了,可是我的样品总扩不出来,哪位高手能帮我指点一下,不胜感激
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)

调整镁离子浓度 做一个梯度
退火温度也做一个梯度
换扩增能力高的酶试试
2楼2008-09-12 09:28:01
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boouy

银虫 (正式写手)

如果模板质量确定没有问题,而引物序列也正确无误,则降低退火温度最有效。
3楼2008-09-12 10:15:47
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daniel867

引用回帖:
Originally posted by snzydong at 2008-9-12 09:28:
调整镁离子浓度 做一个梯度
退火温度也做一个梯度
换扩增能力高的酶试试

谢谢指点。那么镁离子浓度每个梯度降低多少比较好啊?
4楼2008-09-12 11:09:36
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