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[交流]
有谁用过碱液法和一步法提取植物的DNA（碱液法和ROSE法）
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有谁用过这两种方法提取植物的DNA 1.碱液法：取10～20mg幼叶,加100μl0.5mol/ LNaOH研磨后,取40 μl研磨液加入200μl 100 mmol/ L Tris HCl pH7.6缓冲液 (或附加0.5% 不溶性聚乙烯吡咯烷酮, PVP )中, 8 000×g离心5min,上清液即可用于PCR反应。 2.快速一步法（ROSE）法提取DNA： 提取缓冲液为1%SDS，10mmol/Ltris,0.3mol/l EDTA,Ph8.0. 剪碎置于管中,同时加入稍许无菌石英砂 ,3滴ROSE提取缓冲液 ,用带玻璃钻头的电钻充分研磨匀浆。加400ul提取缓冲液 ,混匀后置于90℃水浴中 ,不时颠倒摇匀.温育20min后 ,置于冰浴中 ,使组织沉淀 。置于 4℃下保存备用。 有以下几个问题： 这样提出来的DNA能不能做ssr引物的PCR？ 碱液法提DNA的原理是什么？ 加入的NaOH导致PH值的提高是否对PCR有影响？ 提出来的DNA能保存多长时间？ [ Last edited by ntill on 2008-9-11 at 22:43 ] |
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