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chenyiw5

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助!考马斯蓝方法(Bradford)测水样中蛋白质含量吸光度低于空白样

如题,本人用考马斯蓝染色的方法想要测EPS中蛋白质的含量。用BSA +PBS 缓冲液配成0ug/ml,1ug/ml, 5ug/ml, 10ug/ml的梯度浓度来制标曲,1ml的溶液中加入1ml直接从sigma买回来的Bradford reagent,得到的曲线y=0.019x+0.3099,R2=0.994。至此一切正常,然而,当我加入1ml EPS 提取液想要测样品时,得到的吸光度比0ug/ml标准样的吸光度还低,所以用标曲算出来的浓度是负值。我翻遍了小木虫,发现很多人做此方法有类似的问题但都没有得到较合理的解释,查阅文献也基本可以确定我的标准曲线的斜率和截距都是合理的,我不明白的是就算我的样品中蛋白质浓度很低,为什么吸光度会比用纯水做出来的吸光度还低。

希望有相关经验的大神可以指导一下,真的感激不尽!
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pq177

新虫 (初入文坛)

请问这个问题解决了吗?我也遇到了类似的问题

发自小木虫Android客户端
2楼2018-01-24 20:50:09
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黄双蕾_环科

金虫 (小有名气)

我提的EPS也是这样的情况
3楼2018-05-14 18:54:49
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zwy0417

新虫 (小有名气)

我也是,有的比空白高,有的比空白低。。。

发自小木虫Android客户端
4楼2020-09-29 22:20:44
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