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求助！考马斯蓝方法（Bradford）测水样中蛋白质含量吸光度低于空白样
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如题，本人用考马斯蓝染色的方法想要测EPS中蛋白质的含量。用BSA +PBS 缓冲液配成0ug/ml，1ug/ml, 5ug/ml, 10ug/ml的梯度浓度来制标曲，1ml的溶液中加入1ml直接从sigma买回来的Bradford reagent，得到的曲线y=0.019x+0.3099，R2=0.994。至此一切正常，然而，当我加入1ml EPS 提取液想要测样品时，得到的吸光度比0ug/ml标准样的吸光度还低，所以用标曲算出来的浓度是负值。我翻遍了小木虫，发现很多人做此方法有类似的问题但都没有得到较合理的解释，查阅文献也基本可以确定我的标准曲线的斜率和截距都是合理的，我不明白的是就算我的样品中蛋白质浓度很低，为什么吸光度会比用纯水做出来的吸光度还低。 希望有相关经验的大神可以指导一下，真的感激不尽！ |
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