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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 求大神帮忙看下，我养的人羊膜间充质干细胞，养了几天形态就发生变化？！
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yh65770

铁虫 (初入文坛)

[交流] 求大神帮忙看下，我养的人羊膜间充质干细胞，养了几天形态就发生变化？！ 已有5人参与

实验需要养了2大瓶（225cm培养瓶）羊膜间充质干细胞，是师兄从羊膜组织中提的原代细胞，大概传了有8、9代的样子，然后分了我两瓶，刚开始接手的时候看着形态还比较像干细胞，细长型的，结果我养了3、4天后形态就发生了变化，呈多边形不规则形状总之不像干细胞了，中间就换了次液什么也没干，培养基也没换，看着也没有明显的污染迹象，但形态不知道怎么就改变了，有人说有可能是表型分化了，但文献上不是说羊膜干细胞可以传个10多代都没问题么。。。求大神指点！谢谢了~
 \"求大神帮忙看下，我养的人羊膜间充质干细胞，养了几天形态就发生变化？！\"
求大神帮忙看下，我养的人羊膜间充质干细胞，养了几天形态就发生变化？！-1
求大神帮忙看下，我养的人羊膜间充质干细胞，养了几天形态就发生变化？！-2
 \"求大神帮忙看下，我养的人羊膜间充质干细胞，养了几天形态就发生变化？！-3\"
 \"求大神帮忙看下，我养的人羊膜间充质干细胞，养了几天形态就发生变化？！-4\"
这是10.30号之前的状态，密度还不是很高，但形态看着还像干细胞，下面是几天后的图片
求大神帮忙看下，我养的人羊膜间充质干细胞，养了几天形态就发生变化？！-5
求大神帮忙看下，我养的人羊膜间充质干细胞，养了几天形态就发生变化？！-6
求大神帮忙看下，我养的人羊膜间充质干细胞，养了几天形态就发生变化？！-7
求大神帮忙看下，我养的人羊膜间充质干细胞，养了几天形态就发生变化？！-8
求大神帮忙看下，我养的人羊膜间充质干细胞，养了几天形态就发生变化？！-9
这是11月2.3号照的照片，形态明显发生变化，完全不像干细胞了，到底怎么回事，求各位大神指点一下！~
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1楼 2015-11-04 16:06:08
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guobao007

至尊木虫 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
如果培养基是澄清的就基本排除污染的问题。一个很关键的问题是你现在培养的间充质干细胞是第几代的，如果是你说的已经是10代以后了，这就是典型的间充质干细胞的老化现象，很正常。我们提取的大鼠骨髓间充质干细胞，一般只使用3-5代来做实验，5代以后细胞就会容易出现老化现象，细胞会变大等问题。你需要确定的是羊膜间充质干细胞一般实验中用多少代的。另外原代干细胞对血清要求比较高，你看你使用的血清级别够不够？
看图片你这细胞就是典型的干细胞老化，正常。
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5楼2015-11-05 11:23:18
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Frank0917

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
按以前骨髓间充质干细胞培养经验看，这应该是你代数的原因，属于正常现象。做分化实验应该还是可以的，这是能力没有前面几代强。
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不分享心灵鸡汤，只做实实在在的实验管家
6楼2015-11-05 11:56:21
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yh65770

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by Frank0917 at 2015-11-05 11:56:21
按以前骨髓间充质干细胞培养经验看，这应该是你代数的原因，属于正常现象。做分化实验应该还是可以的，这是能力没有前面几代强。

谢谢，不过都老化成这样了还能诱导分化成骨或软骨吗？
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8楼2015-11-06 15:55:52
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普通回帖

yh65770

铁虫 (初入文坛)
补充两张10.30日时的图片
求大神帮忙看下，我养的人羊膜间充质干细胞，养了几天形态就发生变化？！-10
求大神帮忙看下，我养的人羊膜间充质干细胞，养了几天形态就发生变化？！-11
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2楼2015-11-04 16:09:30
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总有二狗咬朕

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
细胞培养常见问题就是污染，楼主可以看看是不是化学污染、物理污染（即温度、放射线）、细菌污染、支原体污染等：如果不是就看看培养基成分对不对，有没有变质，不然就是菌本身的问题
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我好累，承受这个年纪不该有的帅！
3楼2015-11-04 17:03:38
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yh65770

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 总有二狗咬朕 at 2015-11-04 17:03:38
细胞培养常见问题就是污染，楼主可以看看是不是化学污染、物理污染（即温度、放射线）、细菌污染、支原体污染等：如果不是就看看培养基成分对不对，有没有变质，不然就是菌本身的问题...

谢谢解答！~
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4楼2015-11-04 18:27:50
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yh65770

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by guobao007 at 2015-11-05 11:23:18
如果培养基是澄清的就基本排除污染的问题。一个很关键的问题是你现在培养的间充质干细胞是第几代的，如果是你说的已经是10代以后了，这就是典型的间充质干细胞的老化现象，很正常。我们提取的大鼠骨髓间充质干细胞， ...

谢谢解答！~非常感谢
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7楼2015-11-06 15:54:38
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Frank0917

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by yh65770 at 2015-11-06 15:55:52
谢谢，不过都老化成这样了还能诱导分化成骨或软骨吗？...

你可以试下，可能分化能力没那么强，不过分化成功应该还是没有问题的，注意做好对照。一般成骨分化可以的话，5天左右就能看到形态变化。完全分化才需要长时间。软骨的话，你如果做球的话，一般前几天就能看到了。
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不分享心灵鸡汤，只做实实在在的实验管家
9楼2015-11-06 16:25:14
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yh65770

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by Frank0917 at 2015-11-06 16:25:14
你可以试下，可能分化能力没那么强，不过分化成功应该还是没有问题的，注意做好对照。一般成骨分化可以的话，5天左右就能看到形态变化。完全分化才需要长时间。软骨的话，你如果做球的话，一般前几天就能看到了。...

哦好的，谢谢解答~
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10楼2015-11-09 20:41:00
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