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yh65770

铁虫 (初入文坛)

[交流] 求大神帮忙看下,我养的人羊膜间充质干细胞,养了几天形态就发生变化?! 已有5人参与

实验需要养了2大瓶(225cm培养瓶)羊膜间充质干细胞,是师兄从羊膜组织中提的原代细胞,大概传了有8、9代的样子,然后分了我两瓶,刚开始接手的时候看着形态还比较像干细胞,细长型的,结果我养了3、4天后形态就发生了变化,呈多边形不规则形状总之不像干细胞了,中间就换了次液什么也没干,培养基也没换,看着也没有明显的污染迹象,但形态不知道怎么就改变了,有人说有可能是表型分化了,但文献上不是说羊膜干细胞可以传个10多代都没问题么。。。求大神指点!谢谢了~
 \"求大神帮忙看下,我养的人羊膜间充质干细胞,养了几天形态就发生变化?!\"
求大神帮忙看下,我养的人羊膜间充质干细胞,养了几天形态就发生变化?!-1
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 \"求大神帮忙看下,我养的人羊膜间充质干细胞,养了几天形态就发生变化?!-3\"
 \"求大神帮忙看下,我养的人羊膜间充质干细胞,养了几天形态就发生变化?!-4\"
这是10.30号之前的状态,密度还不是很高,但形态看着还像干细胞,下面是几天后的图片
求大神帮忙看下,我养的人羊膜间充质干细胞,养了几天形态就发生变化?!-5
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求大神帮忙看下,我养的人羊膜间充质干细胞,养了几天形态就发生变化?!-9
这是11月2.3号照的照片,形态明显发生变化,完全不像干细胞了,到底怎么回事,求各位大神指点一下!~
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guobao007

至尊木虫 (知名作家)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
如果培养基是澄清的就基本排除污染的问题。一个很关键的问题是你现在培养的间充质干细胞是第几代的,如果是你说的已经是10代以后了,这就是典型的间充质干细胞的老化现象,很正常。我们提取的大鼠骨髓间充质干细胞,一般只使用3-5代来做实验,5代以后细胞就会容易出现老化现象,细胞会变大等问题。你需要确定的是羊膜间充质干细胞一般实验中用多少代的。另外原代干细胞对血清要求比较高,你看你使用的血清级别够不够?
看图片你这细胞就是典型的干细胞老化,正常。
5楼2015-11-05 11:23:18
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Frank0917

木虫 (正式写手)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
按以前骨髓间充质干细胞培养经验看,这应该是你代数的原因,属于正常现象。做分化实验应该还是可以的,这是能力没有前面几代强。
不分享心灵鸡汤,只做实实在在的实验管家
6楼2015-11-05 11:56:21
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yh65770

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by Frank0917 at 2015-11-05 11:56:21
按以前骨髓间充质干细胞培养经验看,这应该是你代数的原因,属于正常现象。做分化实验应该还是可以的,这是能力没有前面几代强。

谢谢,不过都老化成这样了还能诱导分化成骨或软骨吗?
8楼2015-11-06 15:55:52
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yh65770

铁虫 (初入文坛)

补充两张10.30日时的图片
求大神帮忙看下,我养的人羊膜间充质干细胞,养了几天形态就发生变化?!-10
求大神帮忙看下,我养的人羊膜间充质干细胞,养了几天形态就发生变化?!-11
2楼2015-11-04 16:09:30
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总有二狗咬朕

银虫 (小有名气)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
细胞培养常见问题就是污染,楼主可以看看是不是化学污染、物理污染(即温度、放射线)、细菌污染、支原体污染等:如果不是就看看培养基成分对不对,有没有变质,不然就是菌本身的问题
我好累,承受这个年纪不该有的帅!
3楼2015-11-04 17:03:38
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yh65770

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 总有二狗咬朕 at 2015-11-04 17:03:38
细胞培养常见问题就是污染,楼主可以看看是不是化学污染、物理污染(即温度、放射线)、细菌污染、支原体污染等:如果不是就看看培养基成分对不对,有没有变质,不然就是菌本身的问题...

谢谢解答!~
4楼2015-11-04 18:27:50
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yh65770

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by guobao007 at 2015-11-05 11:23:18
如果培养基是澄清的就基本排除污染的问题。一个很关键的问题是你现在培养的间充质干细胞是第几代的,如果是你说的已经是10代以后了,这就是典型的间充质干细胞的老化现象,很正常。我们提取的大鼠骨髓间充质干细胞, ...

谢谢解答!~非常感谢
7楼2015-11-06 15:54:38
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Frank0917

木虫 (正式写手)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by yh65770 at 2015-11-06 15:55:52
谢谢,不过都老化成这样了还能诱导分化成骨或软骨吗?...

你可以试下,可能分化能力没那么强,不过分化成功应该还是没有问题的,注意做好对照。一般成骨分化可以的话,5天左右就能看到形态变化。完全分化才需要长时间。软骨的话,你如果做球的话,一般前几天就能看到了。
不分享心灵鸡汤,只做实实在在的实验管家
9楼2015-11-06 16:25:14
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yh65770

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by Frank0917 at 2015-11-06 16:25:14
你可以试下,可能分化能力没那么强,不过分化成功应该还是没有问题的,注意做好对照。一般成骨分化可以的话,5天左右就能看到形态变化。完全分化才需要长时间。软骨的话,你如果做球的话,一般前几天就能看到了。...

哦好的,谢谢解答~
10楼2015-11-09 20:41:00
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