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zcqh27

木虫 (正式写手)

[交流] 关于基因工程菌的冻干保藏和液氮保藏

目前,菌株保藏方法,保藏时间比较长的,主要有真空冻干保藏,和液氮保藏。

真空冻干保藏:培养好的菌体(液体菌液离心后收菌体,或斜面培养),用10%脱脂牛奶重悬,分装到安瓿管中,预冻,然后冻干,在真空条件下火焰封口。封口后的菌株可以常温保藏,2~8℃,-80℃或者液氮保藏。
液氮保藏:培养好的菌体,用终浓度10%~20%的甘油与菌液混合均匀,分装到保藏管中,先预冻,再转移到液氮中。

对于一般的微生物来说,真空冻干保藏使最好的方法之一,但是因为基因工程菌涉及到质粒的稳定性,因此冻干未必最好。请问,对于大肠杆菌基因工程中,含有游离的质粒,这两种保藏方法会对质粒有什么影响吗,或者说哪种方法会更好一些?
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么么哒0120

铜虫 (小有名气)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
想问一下楼主,10%的脱脂奶粉重悬,这个10%有什么依据吗?还是说在某个范围内都可以使用,比如10-15%?我看网上大家用的比例都不太一样~
2楼2018-11-28 10:45:22
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