应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教大家的 连接体系都是怎么确定的
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
71/1返回列表
查看: 547  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

xuguang09280036

新虫 (初入文坛)

[交流] 请教大家的 连接体系都是怎么确定的

比如 一般 做多大的 体系    载体和目的 片段 的  量是怎么确定的  ，在已知 大小 和 浓度的情况下  ？ 谢谢大家  我一般是 六微升的 体系 呵呵   最近连接一直不好
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2008-09-10 23:39:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shenye.judy

木虫 (正式写手)
用的是什么载体，片段多大？
赞一下 回复此楼
2楼2008-09-11 11:12:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sonic8362

我用得也是12微升得体系
insert DNA  5微升
vector        1微升
ligationH     6微升
如果连接不好，你可以用agarose eletrophoresis跑一下，看看目的片段和载体比例，一般载体得浓度要比目的片段低很多，3-8倍样子，我最近在做克隆，最后酶切鉴定出成功连接得质粒比例很少，但我稀释了载体浓度后重新连接，这个比例明显提高。你可以试试看。
我是个新手还，希望大家多多交流啊
赞一下 回复此楼
3楼2008-09-11 11:15:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuguang09280036

新虫 (初入文坛)
就是 有啥 公式 之类的  呵呵 来确定 载体和 片段的 比例
赞一下 回复此楼
4楼2008-09-11 15:47:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

greenspringmi

银虫 (正式写手)
目的片段与载体的摩尔比在：6：1~10：1.
赞一下 回复此楼
5楼2008-09-11 15:49:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snzydong

铁杆木虫 (著名写手)
一般摩尔浓度3:1 外源片段多一点  我们最少是十微升体系
赞一下 回复此楼
6楼2008-09-12 09:36:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

daniel867

★
司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 7-13 05:47
我用的是12微升体系：

模板      5.5微升
vector      0.5微升
solutionI    6.0微升

连接效果挺好的。
赞一下(6人) 回复此楼
7楼2008-09-12 11:14:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xuguang09280036 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-25 7/350 2026-03-27 14:47 by 狂炫麦当当
[考研] 334求调剂 +3 雨清天晴 2026-03-21 3/150 2026-03-27 11:30 by 不吃魚的貓
[考研] 316求调剂 +5 江辞666 2026-03-26 5/250 2026-03-27 08:08 by hypershenger
[考研] 324求调剂 +8 hanamiko 2026-03-26 10/500 2026-03-27 08:06 by hypershenger
[考研] 341求调剂 +7 青柠檬1 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:19 by wxiongid
[考研] 求调剂 +5 芦lty 2026-03-25 6/300 2026-03-26 20:49 by 不吃魚的貓
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-26 6/300 2026-03-26 18:03 by 邱gl
[考研] 085601求调剂总分293英一数二 +4 钢铁大炮 2026-03-24 4/200 2026-03-26 16:28 by dick_runner
[考研] 289求调剂 +17 硕星赴 2026-03-23 17/850 2026-03-26 16:18 by 不吃魚的貓
[考研] 285求调剂 +3 AZMK 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:23 by userper
[考研] 一志愿吉林大学材料与化工303分求调剂 +4 为学666 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:27 by BruceLiu320
[考研] 化学调剂 +6 yzysaa 2026-03-21 6/300 2026-03-25 09:27 by aa331100
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-24 3/150 2026-03-24 21:31 by peike
[考研] 食品专硕 一志愿双一流 328 +3 xiaom99 2026-03-21 4/200 2026-03-24 21:20 by lailaisimei
[考研] 材料专硕331求调剂 +4 鲜当牛 2026-03-24 4/200 2026-03-24 15:58 by JourneyLucky
[考研] 384求调剂 +3 子系博 2026-03-22 6/300 2026-03-23 21:45 by 子系博
[考研] 336化工调剂 +4 王大坦1 2026-03-23 5/250 2026-03-23 18:32 by allen-yin
[考研] 070300，一志愿北航320求调剂 +3 Jerry0216 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:16 by 。。堂堂
[考研] 330求调剂0854 +3 assdll 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:01 by 搏击518
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭